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为充分利用水酶法取油后的副产物油茶籽干渣,以提高其固态发酵后产物单细胞蛋白的含量,从蛋白质测定方法的选择、菌种的筛选、发酵条件的优化、发酵过程的探索等方面展开了相关的研究,得到如下结果。(1)通过凯氏定氮法测得试验原料油茶籽干渣中粗蛋白含量为6.29%,真蛋白含量为5.07%。以凯氏定氮法为校准方法,通过比较各种方法测定原料蛋白质含量的数据的稳定性、反应灵敏度、操作的繁琐程度及受干扰的程度,最终选择GB 50095-2010中的分光光度法作为原料及其发酵产物蛋白质含量的测定方法。(2)单菌发酵试验中,以10%的接种量,接种菌体浓度约为1.0x107个/ml~1.0×108个/ml的康宁木霉液体种子,28℃恒温培养,发酵产物粗蛋白含量有最大值17.84%;双菌发酵中,热带假丝酵母和康宁木霉、啤酒酵母和康宁木霉都以1:1的接种比,总接种量10%,28℃条件下恒温培养5d后,粗蛋白含量分别达到了21.23%和20.93%,分别比对照提高了88.88%和86.21%;三菌发酵中,以康宁木霉、啤酒酵母、枯草芽孢杆菌的组合在三菌发酵中效果最好,粗蛋白含量在第6d达到17.76%。考虑到在单菌发酵中,啤酒酵母的发酵效果远远好于假丝酵母,故最终选取康宁木霉与啤酒酵母的组合作为下一阶段的发酵菌种。(3)以接种量、接种比、发酵时间、种子液添加顺序为单因素研究发酵产物的粗蛋白含量,发现当总接种量为15%或者康宁木霉与啤酒酵母接种比例为1:1或者固态发酵6d或者先接种康宁木霉培养48h后再接种啤酒酵母,发酵产物各自的粗蛋白含量最高。以单因素试验的最佳范围为基础,设计正交试验发现最佳发酵条件为:先接种康宁木霉液体种子8.5%,28℃恒温发酵48h后再接种啤酒酵母液体种子8.5%,接种比例1:1,继续发酵96h,产物真蛋白含量达到26.35%。(4)用处于对数生长末期的康宁木霉种子液和啤酒酵母种子液,接种比为1:1,总接种量为17%,先接种康宁木霉种子液,48h后接种啤酒酵母种子液于固态发酵培养基中,发酵过程中活菌数与蛋白质含量同步提升,菌体蛋白得到积累。发酵6d后为成品,发酵产物粗蛋白含量达到27.05%,提高140.66%,真蛋白含量达到了25.67%,提高159.56%。粗纤维含量下降了32.14%,总糖含量下降了50%,康宁木霉和啤酒酵母的活菌数增加到了(2.0±1.0)×108CFU/g。