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背景与目的:肝癌是我国常见肿瘤之一,肝癌发病机制错综复杂,遗传、饮食、病毒和寄生虫感染等均可与肝癌发生发展有关。随着分子生物学发展,有多种肝癌相关基因经过相同或不同研究者多次研究,被认为可能参与到肝癌的发病过程中。Araujo等发现QSOX1在高分化的神经母细胞瘤肿瘤组织中高表达,且在复发率高的病人中也出现高表达。另外,他们还发现QSOX1在神经母细胞瘤的分化和侵袭中起重要作用。QSOX1也被认为可能参与到乳腺癌、前列腺癌等的发生发展过程。目前关于QSOX1与肝癌的发生发展间关系的研究报道甚少,本研究进一步验证QSOX1在肝癌细胞中的表达及其对肝癌细胞生物学功能的影响,揭示QSOX1对肝癌细胞生物学功能所发挥的作用,为肝癌早诊和治疗提供理论基础和实验依据。方法:针对QSOX1的shRNA慢病毒载体的构建由上海吉凯基因技术有限公司完成。将针对QSOX1的shRNA慢病毒载体,以及空病毒载体(带有阴性对照病毒)各转染至人SMMC-7721肝癌细胞,即分别为转染组和阴性对照组。空白对照组为不做任何转染的目的细胞。经筛选出稳定表达株后扩大培养,采用实时荧光定量核酸扩增(qPCR)检测系统,及免疫印迹法(Western-blot)分别检测细胞中QSOX1基因mRNA和蛋白质在肝癌细胞中的表达情况;运用cck-8法通过检测细胞活力以验证细胞增殖情况;采用细胞克隆形成实验测定细胞成瘤能力;利用流式细胞技术检测细胞周期;运用细胞transwell实验和划痕实验分别测定细胞转移和迁移能力。通过spss17.0统计学软件进行统计分析。结果:慢病毒转染组和对照病毒转染组均成功转染;慢病毒转染组qsox1基因mrna和蛋白质表达均分别明显低于空病毒转染组和空白对照组;经cck-8细胞增殖实验发现,慢病毒转染组细胞增殖相对于其他对照组明显减缓(p<0.05);慢病毒转染组细胞克隆数量分别明显低于其他对照组(p<0.05);流式细胞术分析表明,慢病毒转染组与空细胞组比较,慢病毒转染组g1期细胞所占比例明显减少(p<0.001),而s期明显增多,在g2/m期无明显变化;慢病毒转染组与空病毒转染组细胞相比,慢病毒转染组g1期细胞也明显减少,而s期细胞无显著变化,g2/m期细胞明显增多。通过细胞划痕实验观察细胞在0小时、8小时、24小时的迁移情况,结果显示,慢病毒转染组迁移能力在24小时明显降低(p<0.05)。细胞transwell转移实验显示,空细胞组和空病毒组细胞转移数无明显差异,而慢病毒转染组细胞转移数明显减少(p<0.05)。结论:通过慢病毒转染,干扰qsox1基因在smmc-7721细胞中的表达,能降低smmc-7721肝癌细胞增殖能力,克隆形成实验亦表明肿瘤细胞成瘤能力明显减弱。基因敲减后,根据各组细胞周期,结合细胞增殖速度的结果,说明细胞周期可能被阻滞在s期或g2期。这些结果表明,QSOX1基因在肝癌进展中起重要调控作用,可能作为一个靶向指标,指导肝癌的诊断和治疗。