目的探究ANX联合MenSCs对于SD大鼠坐骨神经缺损的影响。方法1.用Percoll分层液分离培养原代MenSCs,CCK-8法检测P6代细胞的增殖情况,流式细胞术鉴定细胞表面标志物;2.化学萃取法制备新西兰大白兔胫神经来源的ANX,用HE染色后光镜观察ANX脱细胞情况;3.将P6代的MenSCs悬液用微量注射器注入ANX后共培养4d,透射电镜观察组织学情况,用免疫荧光法检测共培养体系分泌神经生长因子(NGF)和神经营养因子-3(NT3)的情况;4.制备SD大鼠右侧坐骨神经缺损模型,随机分为自体移植组、单纯ANX组和ANX+MenSCs共培养组,将不同组的支架移植到SD大鼠右侧坐骨神经缺损处;5.移植术后在4w和8w两个不同的时间点,用热板实验、斜坡实验来检测大鼠感觉、运动功能的恢复,通过胫骨前肌湿重比率、和坐骨神经指数(SFI)来检测大鼠神经肌肉功能,甲苯胺蓝染色定位,透射电镜观察髓鞘的恢复情况。结果1.绘制细胞增殖生长曲线显示MenSCs在第3~5天时增长迅速,细胞活性较强;2.流式细胞仪鉴定MenSCs表达CD90和CD73,不表达CD34和HLA-DR;3.HE染色结果显示化学萃取法去除了ANX内的髓鞘及细胞结构,外膜结构完整;4.扫描电镜结果显示ANX组可见基膜结构,ANX和MenSCs共培养体系可见椭圆形的MenSCs在基膜间黏附生长;5.ANX内不表达NGF、NT3,ANX与MenSCs共培养体系内阳性表达NGF、NT3;6.移植术后4w实验结果显示,ANX+MenSCs组的患肢回缩时间优于单纯ANX组,且具有统计学意义(P<0.05),三组间的斜坡坡度无统计学意义(P>0.05),在数值上自体组优于其他两组,而ANX+MenSCs组又优于ANX组,自体移植组的SFI值和胫骨前肌湿重比率都优于ANX+MenSCs组和ANX组,且具有统计学意义(P<0.05),在数值上ANX+MenSCs组均优于ANX组;7.术后4w甲苯胺蓝染色定位透射电镜观察结果表明自体移植组和ANX+MenSCs组的再生髓鞘恢复良好,可见再生血管,ANX组的髓鞘不规则,基质碎片较多;8.移植术后8w实验结果显示,ANX+MenSCs组大鼠的患肢回缩时间短于单纯ANX组,且具有统计学意义(P<0.05),爬坡坡度、SFI值以及胫骨前肌湿重比率均高于单纯ANX组且具有统计学意义(P<0.05),ANX+MenSCs组与自体组相比,两组的患肢回缩时间、爬坡坡度以及胫骨前肌湿重比均无统计学意义(P>0.05),但自体组的SFI值显著增高(P<0.05);9.术后8w甲苯胺蓝染色和透射电镜结果表明与单纯ANX组相比,ANX+MenSCs组和自体组的髓鞘结构更完整,虽有水肿,但形状小而均匀致密。结论ANX和MenSCs的组织相容性良好,共培养体系分泌出NGF和NT3,ANX和MenSCs共培养体系可以作为SD大鼠坐骨神经的缺损和修复实验理想的连接体且其修复效果良好。