DNA影响自组装膜能量转移及其荧光传感研究

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脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleic acid,缩写为DNA)是一类带有遗传信息的生物大分子。特定序列的DNA检测在医学诊断和生物分子机理研究都有重要的意义。荧光共振能量转移(FRET)技术因对距离的极度敏感性而被广泛应用于生物分子结构、性质和定量分析等方面的研究。FRET技术与DNA杂交技术相结合,可用于DNA碱基突变检测、DNA定量分析以及同源性分析等方面。荧光自组装膜具有设计灵活、灵敏度高、操作简便等优点,在化学及生物传感器方面具有广泛的应用前景。DNA分子由于具有纳米尺度的分子直径、分子内和分子间的特异识别特性、负电性的磷酸骨架结构等特质,已被广泛应用在自组装技术方面。本课题即基于自组装技术和FRET技术来研究DNA双链对自组装膜能量转移的影响,并以此构筑DNA传感体系。本论文主要研究内容如下:(1)以氧化石墨烯(GO)为能量受体A,ZnO@CdS量子点为能量供体D,利用邻苯二甲酸二乙二醇二丙烯酸酯(PDDA)和DNA单链作为中间桥梁,构筑Quartz/GO/PDDA/ssDNA/PDDA/ZnO@CdS SAMs自组装膜,研究DNA杂交成双链对自组装能量转移的影响,并探讨DNA链长与膜能量转移的相关性。(2)在上述工作的基础上,构筑Quartz/GO/PDDA/T4-DNA/PDDA/ZnO@CdS SAMs用于DNA序列的荧光识别。实验考察了缓冲溶液和pH值对自组装膜的影响,优化检测DNA的条件,实现了对匹配DNA(P4-DNA)的定量测定。匹配DNA浓度的负对数与自组装膜的相对荧光强度呈良好的线性关系,线性响应范围是7.582×10-11~1.528×10-8mol/L,检出限是8.289×10-12mol/L。(3)以ZnO@CdS量子点为能量供体,CdTe量子点为能量受体,构筑Quartz/PDDA/CdTe/PDDA/T1-DNA/PDDA/ZnO@CdS SAMs自组装膜,并基于荧光共振能量转移对DNA进行界面比率传感。基于能量转移而构建的比率荧光传感不仅能有效降低依据单一荧光强度定量分析的误差,而且可极大提高荧光分析的灵敏度和准确性。
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