目的:没食子(Turkish galls)具有固涩、收敛、燥湿、止血及消炎等作用,是消化系统及牙科疾病的维吾尔族传统药物,也是新疆维吾尔自治区地方医院医院制剂溃结安的单味原料药,用于治疗溃疡性结肠炎有良好的效果。近年来,溃疡性结肠炎疾病的患病人数呈现上升趋势,而目前市场上用于治疗溃疡性结肠炎的药物种类少,并且药物的副作用大。然而,通过临床试验,新疆维吾尔传统药物西依帕溃结安,不仅保证了治疗效果,并且副作用较小,而备受瞩目。但是目前关于溃结安的单味原料药没食子的国内外研究报道的文献极少,缺乏深入系统地研究,不利于没食子的进一步开发与利用。本课题拟对没食子药材进行化学成分分析、血浆和尿液中代谢物鉴定分析以及对其主要活性成分没食子酸、没食子酸甲酯和1,3,6-三-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖进行药代动力学研究,期望丰富没食子药材的药效物质基础研究,为全面、系统地控制没食子药材的质量提供数据基础,并且了解其活性成分在大鼠体内的药代动力学特性,为没食子的深入开发、研究以及临床合理用药提供数据支持。方法:1.没食子药材化学成分的定性分析采用液相色谱-电喷雾电离-离子阱-飞行时间质谱法(High-performance liquid chromatography-electrospray ionization-ion trap-time-of-flight-tandem mass spectrometry,HPLC-ESI-IT-TOF-MS/MS)对没食子化学成分进行定性分析,通过对各个色谱峰的质谱数据进行解析,对比己知化合物的裂解规律,综合保留时间、紫外数据、质谱数据及参考文献报道数据对各个色谱峰进行结构鉴定。2.没食子在血浆和尿液中的代谢物成分分析运用HPLC-ESI-IT-TOF-MS/MS法对血浆和尿液中的代谢物进行定性分析,经过对每个化合物的质谱信息进行解析,参考已知物质的断裂规律,并综合考虑保留时间、质谱数据以及参考文献的报道对各个物质进行鉴定。3.没食子中主要活性成分没食子酸、没食子酸甲酯和1,3,6-三-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖的药代动力学研究运用高灵敏度的液质联用技术,建立能够同时测定大鼠血浆中没食子酸、没食子酸甲酯和1,3,6-三-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖的1c-MS/MS法,并将其应用于没食子中主要活性成分的药代动力学研究。结果:1.没食子药材化学成分的定性分析HPLC-ESI-IT-TOF-MS/MS定性分析,从没食子提取物中共鉴定得到21个化合物,分别为4个酚酸类、15个没食子鞣质类化合物以及2个其他类化合物,其中有13个化合物为首次从没食子中发现。2.没食子在血浆和尿液中的代谢物成分分析通过HPLC-ESI-IT-TOF-MS/MS定性分析,从没食子灌胃给药大鼠后,在大鼠血浆和尿液中共鉴定得到22个化合物,包括没食子酸类、双没食子酸类、Benzoic acid,3,5-dihydroxy-4-[(3,4,5-trihydroxybenzoyl)oxy]-,methyl ester 以及其他类化合物,其中有21个化合物为首次从没食子的代谢物中发现。3.没食子中主要成分没食子酸、没食子酸甲酯和1,3,6-三-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖的药代动力学研究本实验首次建立一个同时测定大鼠血浆中没食子酸、没食子酸甲酯和1,3,6-三-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖的LC-MS/MS法。该方法的方法学考察均符合要求,且灵敏、选择性好、样品处理方法简便、分析时间短,成功应用于没食子灌胃给药后大鼠血浆中没食子酸、没食子酸甲酯和1,3,6-三-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖的药代动力学研究。大鼠灌胃给予没食子提取液后,没食子酸、没食子酸甲酯和1,3,6-三-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖均吸收迅速、消除缓慢。没食子酸、没食子酸甲酯和1,3,6-三-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖的达峰浓度Cmax和药时曲线下面积 AUC0→t分别为 32.5±41.51 μg/mL 和 97.12±76.78μg·h/mL,1039.88±689.88μg/mL 和 3822.43±1855.13 μg.h/mL,1.68±1.51 μg/mL 和 6.4±4.22 μg h/mL。结论:本课题首次建立一个HPLC-ESI-IT-TOF-MS/MS法对没食子中化学成分进行定性分析,为全面、系统地控制没食子药材及其医院制剂的质量提供了一个有效的新方法;首次报道没食子中三个主要活性成分没食子酸、没食子酸甲酯和1,3,6-三-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖的药动学行为,不仅有助于了解其主要活性成分在体内的吸收变化和消除规律,而且有利于正确评价其用药安全性和有效性,为没食子的临床合理用药提供指导。