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胃癌占我国恶性肿瘤首位。近几年胃癌发病率虽稍有下降，目前仍是严重危害我国人民生命健康的恶性肿瘤之一。虽有关胃癌的基础理论和临床研究均取得了一定成果，但是由于进展期胃癌术后易复发和转移，5年生存率较低。合理选择胃癌综合治疗方法有望改善胃癌的预后。现有的胃癌化疗方案选择主要依据肿瘤的浸润深度和淋巴结转移情况。胸苷磷酸化酶(thymidine phosphorylase．TP)是嘧啶核苷磷酸化酶家族成员之一，是合成、限制细胞生长的必需酶。双氢嘧啶脱氢酶(dihydropyrimidine dehydrogenase．DPD)催化5-氟尿嘧啶分解为二氢-5-氟尿嘧啶而灭活5-氟尿嘧啶的细胞毒作用。近年对TP研究表明，TP在结构和功能上与血小板衍生内皮细胞生长因子(platelet-derived endothelial cell growth factor．PDECGF)相同。在大多实体肿瘤中具有高度活性，且与肿瘤血管形成、快速生长和浸润能力有关，并能阻止肿瘤细胞进入凋亡，与肿瘤预后较差相关。另外，TP表达还受一些细胞因子、药物、物理及化学因素调节。检测胃癌肿瘤组织TP、DPD表达情况，望能预测胃癌病人对化疗药物敏感性。本课题采用ELISA法检测胃癌组织及正常胃黏膜TP、DPD蛋白浓度，免疫组化(Envision二步法)观察肿瘤内微血管密度(microvessel density．MVD)。探讨胃癌组织TP浓度与正常胃黏膜、胃癌各病理参数之间以及TP与肿瘤MVD之间的关系。 浙江大学硕土学位 中文扫要 例，平均年龄62 岁（36－78）。手术方式：远端胃癌 根治术23 例，近端 胃癌根治术吕例，全胃切除（包括联合脏器切除）8例，姑息性胃大部切除 6例。手术切除标本取新鲜肿瘤组织及正常胃勤膜各300mg，依次编号后保 存在－80 度低温冰箱：胃切除标本福尔马林固定后再取肿瘤组织及正常胃组 织各一块，制成蜡块并依次编号。 2．试剂：本课题采用上海罗氏制药公司提供的 TP、DPD EL匕A 试剂盒； 北京中山生物技术有限公司提供的CD34鼠抗人单克隆抗体及美国DAKO 公司提供的 Envison二步法试剂盒。 3．实验方法 3．l．胃癌组织和正常胃粘膜ELISA 检测法。低温保存的胃癌及正常胃粘 膜组织，制成组织匀浆，加 10mMol Tris 缓冲液 1．3ml，100，0009高速 离心1小时，提取上清液，l：2稀释。余步骤按TP及DPD ELISA试剂 盒说明进行。 3．2．免疫组化 Envison二步法。胃癌及正常胃组织制成的蜡块，切成 sum 厚切片各3张，l张常规HE染色，另2张采用Envision二步法免疫组 化染色。余步骤按 CD34 鼠单克隆抗体及 Envison 二步法试剂盒要求 进行。 4．结果判断 4．1．ELISA法测得肿瘤及正常组织TP及DPD OD值，按试剂盒说明采用 半对数回归方程，求得肿瘤组织、正常组织TP、DPD值，单位为ng／ml。 4．2．免疫组化微血管染色计数方法。参照weinder评判标准，计算肿瘤间 质和正常胃组织着色微血管。凡呈现棕色单个内皮或内皮细胞簇者均 作为1 个血管计数单位，但血管肌层较厚及管腔面积大于8 个细胞直 径的血管不计数。每张切片在200倍视野下计数5个视野，取平均值。 5．统计方法 5．1．胃癌组织TP、DPD蛋白浓度与正常胃组织TP、DPD比较采用非参数 检验 WllCOXOfl SignCd ranks test（配对符号秩和检验）。 5．2．胃癌组织TP蛋白浓度及MVD与胃癌各病理参数之间分析采用One－ WayANOVA（方差分析）。 2 浙江大学硕土学位 中文拘要 — — 5．3胃癌组织 TP与 MVD相关性分析采用 Sperman’rho检验。 54胃癌组织MVD与正常组织MVD比较采用配对t检验。 结 果 1．胃癌组织与正常胃组织TP、DPD蛋白浓度检测结果。 11 胃癌组织TP浓度明显高于胃正常组织（P＜0001），而胃癌组织DPD 与正常胃组织相比差异无显著性（P—0623）。 1．2胃癌组织 TP蛋白浓度高低与癌细胞分化程度有关（F—6．O08，P—0．of 8） 而与胃癌大体类型、浸润深度、淋巴结转移、TN M分期、远处转移、脉 管癌栓 无显著性差异。 13胃癌组织TP与DPD浓度有相关性仁一O537，Prto．001）。 2 Envision免疫组化染色结果 ZI胃癌组织 MVD明显高于非肿瘤组织（t—1146，Prt0001）。 2．2胃癌组织 MVD与肿瘤组?