氧化苦参碱保护大肠上皮细胞屏障机制的研究

来源 :中国医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gzliuwei2008
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目的:揭示氧化苦参碱保护大肠上皮细胞屏障机制。   方法:培养人结肠腺癌细胞株(Caco-2),分别设正常对照组(不加刺激物及干预因素);损伤模型对照组(加入血小板活化因子终浓度分别为100ng/L和200ng/L);氧化苦参碱对照组(氧化苦参碱终浓度分别为100μg/ml和200μg/m1)氧化苦参碱治疗组(氧化苦参碱终浓度分别为100μg/ml和200μg/ml,30 min后,加入PAF100ng/L),24h后进行实验。MTT比色法检测细胞活力。PCR法和Real-Time PCR法检测紧密连接蛋白ZO1和Occludin mRNA表达的变化。   结果:MTT比色法检测细胞活力显示氧化苦参碱浓度在100μg/m1-400μg/m1之间,细胞的增值和细胞活力增加;浓度在400μg/ml-1000μg/ml之间,细胞的增值和细胞活力减弱。血小板活化因子浓度在100ng/L-6000ng/L范围内均未影响到细胞的增值和细胞活力。血小板活化因子作用后,损伤模型对照组ZO1和OccludinmRNA表达有下降,氧化苦参碱治疗组mRNA表达均升高,100μg/ml组升高最为明显。   结论:氧化苦参碱可以通过改变大肠上皮细胞旁间隙紧密连接蛋白的表达而抑制大肠上皮细胞旁间隙通透性扩大,起到保护大肠上皮细胞屏障作用。预防性给药效果明显,合适的药物浓度可以使预防效果达到最大化。  
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