反式白藜芦醇对β-淀粉样肽致痴呆大鼠的保护作用及机制

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目的:观察反式白藜芦醇(trans-resveratrol,TR)对β-淀粉样肽(Aβ25-35)诱导痴呆大鼠海马旁回的保护作用及机制。方法:SD大鼠分为3,20月龄2组,并随机将其分为4组:假手术组、模型组、低与高剂量TR组。用Aβ25-35诱导痴呆后,低、高剂量组分别予TR10、40 mg?kg-1?d-1灌胃,假手术组、模型组予0.9%Na Cl(1 ml/100 g)灌胃,连续10 d。采用Morris水迷宫法了解大鼠学习记忆能力。用RT-PCR法检测8组大鼠海马半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、DNA聚合酶γ(DNA pol-γ)的表达。用蛋白免疫印迹方法(Western-blotting,WB)检测海马APP、caspase-3及DNA pol-γ蛋白的表达及透射电镜观察大鼠海马突触数目的变化和线粒体的形态改变。结果:定位航行实验逃避潜伏期假手术组为(第一天50.9±27.4、第二天49.8±24.9、第三天34.8±15.4、第四天23.8±12.3);模型组为(第一天88.4±19.8、第二天68.3±29.3、第三天51.1±23.2、第四天43.9±20.2);TR低剂量组(第一天78.4±17.0、第二天61.3±24.6、第三天48.1±18.7、第四天37.9±15.8);TR高剂量组(第一天67.7±20.7、第二天54.0±26.2、第三天40.4±23.1、第四天33.2±20.4);与假手术组比较,模型组、TR高、低剂量组逃避潜伏期延长(P<0.05)。空间探索实验穿越平台次数假手术组为6.3±3.5,模型组为2.1±1.8,TR低剂量组为2.7±1.7,TR高剂量组为4.4±2.4,与假手术组比较,模型组、TR高、低剂量组穿越平台次数减少(P<0.05)。RT-PCR法检测caspase-3、DNA pol-γ的表达,模型组比假手术组caspase-3、DNA pol-γ表达增多(P<0.01),TR对caspase-3、DNA pol-γ表达下调明显(P<0.01)。模型组3月龄较20月龄大鼠caspase-3表达量高(P<0.05)。用药组3月龄比20月龄大鼠caspase-3表达量高(P<0.05)。WB法检测caspase-3、DNA pol-γ、APP表达,模型组比假手术组caspase-3、DNA pol-γ、APP表达增多(P<0.05),TR对caspase-3、DNA pol-γ、APP表达下调明显(P<0.05)。透射电镜观察海马突触数目,模型组较假手术组突触数目减少(P<0.05),与模型组比较,TR高、低剂量组海马突触数目增多(P<0.05)。模型组线粒体结构不清,肿胀,嵴消失,呈空泡化改变;TR高、低剂量组线粒体仍有少量空泡化改变,但较模型组明显改善,嵴逐渐恢复。结论:TR对Aβ25-35诱导AD大鼠海马神经元有一定保护作用,其机制可能与下调caspase-3、DNA pol-γ、APP的表达有关。
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