抗HBsAg抗体分子生物构建及生物学功能研究

来源 :南开大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiawayu
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目的:乙型肝炎病毒感染可引起急性、慢性肝炎、肝硬化和肝细胞癌,是重大的公共卫生问题。临床上,通过检测HBV血清标志物来辅助判断HBV感染与否、评价预后、治疗方案和药物反应等。HBsAg是感染乙型肝炎病毒后最早出现在血液中的标志物,具有较强的免疫原性,是检测乙型肝炎病毒感染情况的最重要的指标之一。本课题目的为应用分子生物学方法构建抗HBsAg抗体并研究其生物学功能。   方法:实验室前期工作筛得一株抗HBsAg单链抗体,我们构建了全抗体L/PcDNA3.1(+)H/PcDNA3.1(+)真核表达载体,然后将其转染至293F细胞株,成功表达纯化了抗HBsAg抗体HB-19-2,应用ELISA方法测定抗体的结合活性,通过测定HepG2.2.15细胞培养上清HBsAg的含量和HBV DNA拷贝数评估抗HBsAg抗体HB-19-2的中和乙肝病毒的能力。   结果:我们成功构建表达了具有较强的HBsAg结合活性和特异性的抗HBsAg单克隆抗体HB-19-2,且HB-19-2拥有极好地中和HBV的活性。   结论:我们成功构建和表达了具有很强的结合活性和生物学功能的抗HBV中和性单克隆HB-19-2。
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