【摘 要】
：
人胰岛素样生长因子(huIGF-I)是一种具有促进生长、促进细胞有丝分裂作用,又具有类似胰岛素代谢活性的小肽.在临床上,对糖尿病、骨质疏松症、分解代谢疾病、Laron综合症、侏
论文部分内容阅读
人胰岛素样生长因子(huIGF-I)是一种具有促进生长、促进细胞有丝分裂作用,又具有类似胰岛素代谢活性的小肽.在临床上,对糖尿病、骨质疏松症、分解代谢疾病、Laron综合症、侏儒症的治疗等有重要的应用价值.该研究利用甲醇毕赤氏酵母表达系统对huIGF-I基因进行了表达研究和高效表达菌株的筛选.首先,构建克隆载体:将改造的人胰岛素样生长因子(huIGF-I)基因直接克隆到T-载体,并进行DNA序列测定;其次,构建表达载体;将huIGF-I基因克隆到克醇毕赤氏酵母Pichia pastoris的YIP型表达载体上,通过Zeocin抗生素筛选,dot blot鉴定,获得了一个重组表达载体pGAPZ.<,-A>-huIGF-I.再次,构建pGAPZ<,α-A>-huIGF-I/酵母工程菌株;利用化学法和电激法将重组表达载体转化甲醇毕赤氏酵母GS115(his4),经Zeocin抗生素筛选、PCR检测SDS-PAGE电泳鉴定后,得到了重组菌株;最后,筛选高效表达菌株:利用SDS-PAGE进行高表达菌株的筛选,得到高表达huIGF-I重组酵母菌el和cl,表达水平达32.0mg/L和40.5mg/L,占分泌蛋白的30﹪-40﹪.对重组蛋白质进行了初步纯化研究.用Western blot检测表明重组蛋白具有huIGF-I抗原活性.高表达菌株发酵产物的活性测定结果表明重组蛋白具有促进细胞增殖的作用.该研究重点对huIGF-I的酵母高效表达菌株进行筛选和鉴定,筛选出高效表达菌株,为临床应用奠定基础,将具有广阔的临床应用前景.
其他文献
该研究以中国农业科学院作物品种资源研究所收集保存的国内外5份蓝粒和17份紫粒小麦为材料,采用快速粘度仪、揉面仪、微分扫描热量仪、高效液相色谱仪等先进方法及SSR技术,分
关键词：作文教学 真话 自己话 语文教学里，作文教学首当其冲，语文教学的根本目的就是培养学生的口头表达能力和书面表达能力，其中书面表达能力主要就是作文能力。目前小学作文教学还存在不少问题，学生作文内容空洞，言之无物，学生怕作文，老师叫头疼，这就是一些较为突出的问题。造成这些问题的原因，主要在小学作文教学过程中存在“三重三轻”的现象，主要是：1、重模仿，轻创作；2、重数量，轻质量。并且，小学生作文
本试验在海南砖红壤中施用膨润土和塘泥两种改良剂,通过两年的盆栽试验测定盆栽土壤部分化学性质和作物生长指标,评定膨润土和塘泥的对酸性土壤的改良效果。结果表明:1膨润土
采用了大垄双行的种植方式，在正常种植方式的适宜密度、增加和减少5000株／hm~2的三种密度下对三种株型(平展型、中间型和耐密型)玉米群体的冠层结构和微环境进行构建，并对其冠层内叶片的光合特性进行了全面测定和分析。结果表明： 1．大垄双行的种植方式构建出了高产玉米群体冠层的微环境特性。使玉米群体冠层内中下层叶片的光量子密度(PFD)有明显增加，其中，中层较对照增加30-40％，下层较对照增加
为了提高创意产业集群创新水平,利用社会网络分析方法,基于关系网络视角构建创意产业集群创新网络知识传播互动模型.设计问卷并进行访谈调查,以兴城市阿里巴巴实力产业群园区
以大棚栽培的早熟温州蜜柑‘宫川’为试材,研究了果实发育及延迟采收过程中果实品质与抗氧化能力的变化。结果表明,延迟采收期间果皮、囊瓣皮部分占全果的比例维持一个较低水
自60 年代Meyer 等在世界上培育出第一个具有异常棉细胞质的雄性不育系以来,国内外对棉花细胞质雄性不育系(简称CMS)及其应用的研究便深入展开。棉花晋A 不育系是从远缘杂种后代[(陆地棉×瑟伯氏棉)]×[(亚洲棉×陆地棉)]中选育出的新的胞质不育系。本文主要从晋A 的形态特征及育性表现、晋A 及其保持系的同工酶分析、晋A 不育系的回交效应、晋A 不育系的杂种优势利用等四方面,对其遗传背景与杂种
大豆[Glycine max (L.) Merr.]是一种优质的蛋白资源,是人类和动物最重要的植物陛蛋白来源之一。大豆蛋白质氨基酸组分齐全,但含硫氨基酸(Cys和Met)含量低,限制了大豆的营养价值。而植物是从硫的同化开始合成含硫氨基酸的。硫转运蛋白是植物体对硫酸盐的吸收、运输硫时所必需的蛋白。是影响含硫氨基酸代谢途径中重要的影响因素。通过对GmSutrl;2b基因转化烟草并对其功能验证,结果表明
水稻是世界上最重要的粮食作物之一,提高粮食产量具有重要意义。构成水稻产量性状主要包括每穗粒数、有效穗数和粒重等,属于数量性状。粒形大小是粒重的决定因素,它包括粒长、粒宽和粒厚。粒形不仅影响水稻产量,还影响水稻品质,水稻粒形研究对育种具有重要指导意义。本研究大粒形粳稻地方品种螃蟹谷与小粒形籼稻品种N643杂交、93-11与来自斯里兰卡的小粒籼稻品种苏旺往尔(SWWR)杂交,经自交、回交,逐步解析粒型
该文对山西各地区及三个外省地区番茄叶霉[Fulvia fulva（Cooke） Cifferri]和灰霉病菌（Botrytis cinerea Pers.）对多菌灵、速克灵、乙霉威、代森锰锌的抗性进行了监测.在此基础上