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目的:观察变形链球菌防龋基因疫苗pVAX1-SPG经肌肉注射、颌下腺周注射，鼻腔粘膜滴注免疫BALB／c小鼠后重组质粒的pVAX1-SPG原位表达和免疫效果，并探索免疫的最佳途径。
方法:
1．利用质粒纯化试剂盒大量抽提重组质粒pVAX1-SPG及空载体质粒pVAX1，紫外分光光度计测定所抽提质粒的OD值，并计算其浓度和纯度，贮存以备免疫动物。
2．动物选择与分组：满6—8周龄的BALB／c小鼠40只，随机分为5组，分别为：A组：pVAX1—SPG双侧颌下腺区注射组；B组：pVAX1—SPG股四头肌注射组；C组：pVAX1-SPG鼻腔滴注组；D组：pVAX1(空载质粒)股四头肌注射组(阴性对照组)：E组：生理盐水鼻腔滴注组(空白对照组)。每组10只BALB／c小鼠。每只BALB／c小鼠的质粒DNA用量均为100μg(100μ g／100μL).
3．免疫时间：共免疫3次，首次免疫后间隔1周以同样剂量加强免疫1次，再间隔1周加强免疫第2次。
4．原位表达检测：第1次免疫后第3天处死2只动物，取注射部位股四头肌、颌下腺、鼻腔粘膜标本，常规固定、包埋，5μ m连续切片，作免疫组织化学SP法染色。
5．样品采集时间和特异性抗体的检测：分别于首次免疫前1天和免疫后第1、2、3、4周采集血液、唾液样品。血液中IgG和唾液中S—IgA采用酶联免疫吸附实验(间接ELISA法)检测。
6．动物一般安全性检验：称量各组动物的初重、终重，计算体重差值。观察接种疫苗处有无组织坏死现象。并于最后处死动物时取心、肝、脾、肺、肾做病理检查。
结论:①基因疫苗pVAX1—SPG具良好的免疫原性，能诱导BALB／c小鼠外分泌液和血液中特异性抗变形链球菌表面蛋白和葡聚糖结合蛋白抗体的产生；②
pVAX1-SPG在动物体内能够正确表达。⑨鼻腔粘膜免疫是简便有效的免疫途径。
④pVAX1-SPG对动物的安全性指标无明星影响。