随着人类基因组计划的完成，各基因所对应的蛋白质功能的阐明已成为生命科学面临的重要任务之一。而蛋白质与蛋白质之间的相互作用可为我们了解每个蛋白质具体的功能提供重要的信息。 本研究旨在通过GST Pull-Down和CO-immunoprecipitation等常规技术对酵母双杂交筛选所得到的107对人肝来源蛋白质相互作对进行进一步的鉴定确认。研究中先向pET23a中分别引入GST和Myc标签使其能在将要克隆的目的基因的N端进行融合表达，再在其后插入一个带Prrn启动子的GFP作为填充片段，同时在GFP两端引入15bp的同源臂以使得能够进行高通量的无酶克隆方式进行克隆，从而得到两个在能在大肠杆菌中进行表达的载体pGETGG和pMETG。将人肝来源蛋白质的全长基因分别克隆至pGETGG和pMETG中得到重组表达质粒后，转化大肠杆菌BL21(DE3)，用IPTG在37℃诱导1hr，SDS-PAG E电泳检测发现，106个pGST-Xs重组表达质粒中有74个实现了大量表达，且有31个形成可溶性蛋白；而103个pMyc-Ys中有65个成功大量表达，其中21个是可溶性蛋白。31个可溶的GST-X与 21 个可溶的Myc-Y有16对配对成功。先用GSTPull-Down检测这16对相互作用，有2对已经得到了阳性结果，但最后还得用CO-immunoprecipitation进一步完成在体内的验证工作。