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研究背景: 扁桃体肥大是儿童耳鼻喉科常见疾病,是引起儿童睡眠呼吸暂停低通气综合症(Obstructivesleepapnea-hyponeasyndromeOSAHS)的最主要原因之一。目前认为扁桃体肥大的发生与感染因素、变态反应因素、局部微环境改变及功能障碍等因素有关;也有研究认为扁桃体肥大是免疫应答失调的结果,有研究证实调节性T细胞(regulatoryTcell,Treg)表达下调可能在扁桃体肥大的过程中发挥了重要作用;黄芪多糖是从中药黄芪中提取的有效成分之一,具有广泛的免疫调节作用。文献报道在血液系统中,黄芪多糖可通过调控Treg细胞增殖和分化发挥其免疫治疗作用,然而在淋巴组织中,黄芪多糖是否具有类似的作用尚未见文献报道。 目的: 应用黄芪多糖(Astragaluspolysaccharides,APS)作用于离体培养的扁桃体肥大组织细胞,观察培养状态APS对Treg细胞及其细胞因子IL-10、TGF-β1以及Treg细胞管家基因FoxP3mRNA表达的影响,从而明确APS对扁桃体Treg细胞调控机制,为药物治疗扁桃体肥大提供新的思路。 方法: 收集30例扁桃体肥大行手术切除患儿的扁桃体组织,制备扁桃体淋巴细胞悬液,将制备好的单细胞悬液随机分为实验组(分别用不同终浓度的黄芪多糖:50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml加入制备的扁桃体单细胞悬液进行培养)和对照组(不加黄芪多糖,加入等量磷酸盐缓冲液),于培养0h、24h、48h和72h后,分别行流式细胞术(FCM)检测Treg细胞比例,酶联免疫吸附试验(Elisa)法检测培养上清液中IL-10、TGF-β1细胞因子水平,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测Treg细胞FoxP3mRNA基因表达。 结果: 培养24h、48h、72h后,Treg细胞百分率均不同程度升高,与对照组相比,除24h培养下,200μg/mL组(5.03±0.63)与对照组(5.46±0.87)无统计学差异,其他组差异均有统计学意义(P<0.05);与50μg/ml、100μg/ml浓度相比,200μg/mL组促进Treg水平升高不明显;同一浓度黄芪多糖培养下,不同时间点组间比较,50μg/ml组和100μg/ml组差异均有统计学意义(P<0.05)。 培养24h、48h、72h后,Foxp3表达与对照组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05);在同一浓度黄芪多糖培养下,Foxp3mRNA水平在不同时间点组间比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。 培养24h、48h、72h后,IL-10及TGF-β1水平均不同程度升高,与对照组相比,50μg/mL组、100μg/mL组差异均具有统计学意义(P<0.05);在同一浓度黄芪多糖培养下,IL-10、TGF-β1水平在不同时间点组间比较,50μg/ml组和100μg/ml组差异均有统计学意(P<0.05)。 结论: 50μg/ml、100μg/ml浓度黄芪多糖可上调扁桃体肥大组织Treg细胞及IL-10、TGF-β1的表达,具有时间依赖的特点;200μg/ml浓度黄芪多糖抑制Treg细胞及IL-10、TGF-β1的表达;黄芪多糖可能具有调控扁桃体肥大的作用。