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本研究以清远麻鸡、广西三黄鸡和贵妃鸡为研究材料,通过表型观察初步判定3个群体鸡120日龄羽毛的发育情况,通过制作石蜡组织切片、苏木素-伊红(H.E)染色,对清远麻鸡不同羽毛发育时期初级毛囊显微结构变化进行观察;以血管内皮生长因子及其受体2基因为候选基因,采用直接测序法和PCR-SSCP/RFLP方法检测候选基因的单核苷酸多态性,探讨不同基因型及基因型组合与清远麻鸡、广西三黄鸡和贵妃鸡干毛性状的相关性;并运用实时荧光定量PCR技术(RT-PCR)分析120日龄干毛与未干毛清远麻鸡VEGF和VEGFR-2基因在各组织中表达丰度,旨在为家禽羽毛发育生物学及深入研究其调控机制提供参考,研究结果如下:(1)表型观察结果显示,未干毛羽毛基本处于生长期,可见羽轴粗大呈灰黑色、充满羽髓液和毛细血管、羽根部深入皮肤组织中;而干毛羽毛基本处于休止期,羽枝收缩细化、羽轴中无羽髓液、呈中空透明状、羽根部血管收缩、与皮肤组织结合较为疏松。通过对比3个不同品种鸡群干毛情况,发现他们之间羽毛发育存在一定差异,清远麻鸡、广西三黄鸡和贵妃鸡的干毛评分分别为86.932、87.917和41.917,前两个群体均极显著高于贵妃鸡(P<0.01)。清远麻鸡初级毛囊H.E染色发现,相比干毛毛囊,横切面可见未干毛毛囊毛囊壁明显增厚,毛囊中内羽鞘和羽髓液清晰可见、毛囊羽嵴明显,纵切面可见未干毛毛囊真皮乳头发育较为成熟、毛囊底部血管密集;经统计表明,生长期毛囊平均直径为222.24μm,是休止期毛囊直径的2倍,生长期毛囊深度比休止期高出178.05μm,休止期毛囊密度平均为6.88个/cm2,比生长期多出2.34个/cm2。(2)本研究分别对VEGF和VEGFR-2基因外显子区域设计了6对和9对引物,其中引物P1~P6对VEGF基因外显子区域的检测结果发现均无突变;引物R1~R9在VEGFR-2基因中共发现4个SNPs,分别为引物R3、R5和R6检测到的exon5-A+7009G、intron7-C+9869G和exon9-G+10224A、exon10-T+11163C位点;群体遗传学分析表明,intron7-C+9869G和exon9-G+10224A位点在清远麻鸡和贵妃鸡群体中均处于Hardy-Weinberg非平衡状态(P<0.01),exon10-T+11163C位点在清远麻鸡群体处于Hardy-Weinberg非平衡状态(P<0.05)。除了exon5-A+7009G位点和贵妃鸡中exon9-G+10224A位点外,其他各位点在各群体中均属于中度多态位点;不同基因型与干毛性状关联分析显示,exon9-G+10224A位点在清远麻鸡群体中只有两种基因型CD和DD,且DD型通管评分极显著高于CD型(P<0.01),其他位点上基因型之间均差异不显著;在贵妃鸡群体中:exon9-G+10224A位点CD型显著高于CC型和DD型(P<0.05),exon10-T+11163C位点中EF型占据优势,分别显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)高于FF型和EE型;不同基因型在广西三黄鸡群体中均差异不显著。单倍型分析结果显示,突变位点exon5-A+7009G和intron7-C+9869G在广西三黄鸡群体中形成1个稳定的单倍型块,由3种非零单倍型构成,其单倍型和单倍型频率分别为AC(50%)、AG(44.2%)和GC(5.8%)。不同基因型组合与干毛评分的分析表明,AACDEFGG组合基因型在清远麻鸡干毛评分中显著低于其余6种组合基因型(P<0.05),在广西三黄鸡群体中组合基因型AACDFFGH为优势基因型组合,干毛评分高达98.33;在贵妃鸡群体中,AADDFFGH、AADDFFHH基因型组合为该群体的优势基因型组合。(3)通过RT-PCR分析了清远麻鸡VEGF和VEGFR-2基因在干毛与未干毛鸡中各组织的表达情况。结果表明:以干毛鸡为对照,VEGF基因在未干毛鸡肺脏组织中的表达量增至最大,是干毛鸡的3.62倍(P<0.01);在心脏组织中,VEGF基因的表达量则稍微下调(P>0.05);VEGFR-2基因在皮肤、肾、脾、肺、卵巢和垂体中均出现显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)上调表达;在心脏组织中则显著降低(P<0.05)。在皮肤组织中,VEGF和VEGFR-2基因在未干毛组的表达量均显著高于干毛组(P<0.05),分别是干毛组的2.62倍和1.65倍。