HBV感染不同免疫状态与sICAM-1表达的关系

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目的目前对HBV感染与病毒标志、免疫指标等的研究已有不少报道,但对HBV感染不同免疫状态与血清sICAM-1表达的关系国内外尚未见报道。目前国内外把研究的重点都放在了HBV感染的发病机制和相应的治疗上,虽然取得了一些进展,但在有些具体的发病环节上仍不是十分清楚,这也给以后的治疗带来了一定困难,所以结合目前国内外研究趋势与我们的研究基础,根据西医疾病的分类诊断,通过对广西地区HBV感染不同免疫状态的调查,同时检测其sICAM-1的表达,探索HBV感染不同免疫状态与血清sICAM-1表达的关系,可以为临床治疗提供理论依据。方法用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定sICAM-1含量。①包被:用0.05M PH9.9碳酸盐包被缓冲液,将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。②加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。③加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml,37℃孵育0.5~1小时,洗涤。④加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。⑤终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。⑥结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。结果①用计量资料两个样本均数t检验统计后得知,免疫耐受与健康对照组sICAM-1表达无显著差异(P>0.05)。②用计量资料两个样本均数t检验统计后得知,免疫清除与健康对照组sICAM-1表达有差异(P<0.05)。③用计量资料两个样本均数t检验统计后得知,免疫不全与健康对照组sICAM-1表达无显著差异(P>0.05)。④用计量资料多个样本均数F检验统计后得知,免疫清除与免疫耐受和免疫不全sICAM-1表达有差异(P<0.05),而免疫耐受与免疫不全之间sICAM-1表达则无显著差异(P>0.05)。结论①免疫清除sICAM-1表达高于健康对照组。②免疫耐受与免疫不全sICAM -1表达与健康对照组无显著差异。③免疫清除sICAM-1表达高于免疫耐受与免疫不全,而免疫耐受与免疫不全之间sICAM-1表达则无显著差异。
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