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目的:构建人内皮抑素(human Endostatin)原核表达质粒pET28a/hES,并与简化人纤溶酶原饼环区(predigested human PlasminogenKringle5,predhPK-5)在大肠杆菌中实现共表达。
方法:以RT-PCR法从人肝癌组织中扩增人内皮抑素基因,利用基因克隆技术构建原核表达质粒pET28a/hES并与pGEX-1λT/predhPK-5共同转化E coliBL21(DE3)诱导表达。
结果:成功构建pET28a/hES,其与pGEX-1λT/predhPK-5的共转化子在双抗生素压力下可以共存,并在E coli BL21(DE3)中成功共表达了人内皮抑素及简化的人纤溶酶原饼环区5。
结论:构建了人内皮抑素原核表达质粒pET28a/hES,为进一步研究打下基础。利用不相容质粒共表达了人内皮抑素及简化人纤溶酶原饼环区5,对基因共表达方法作了有益探索,验证了不相容质粒共表达方法的可行性。