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抑郁症和焦虑症是常见的精神类疾病,严重影响人们生活质量,目前常见化学治疗药物具有不同程度的不良反应,我国药食同源资源丰富,其中部分具有抗焦虑抗抑郁活性。网络药理学是一种基于计算机辅助算法和构建虚拟模型来实现多靶点预测的创新技术。本研究拟通过网络药理学,以“疾病靶点-活性成分-药食同源药材”思路来筛选抗焦虑抑郁核心的药食同源药材,结合KEGG富集分析预测其作用机制,并利用分子对接技术预测活性成分与疾病靶点结合活性。建立皮质酮损伤PC12细胞抑郁焦虑模型,以细胞活性实验进一步确定配方(GDGSHJ),检测GDGSHJ中总黄酮、总多酚、β-谷甾醇、豆甾醇、美迪紫檀素含量,通过测定LDH、细胞凋亡实验解释其神经保护作用机制。建立慢性不可预见性温和应激小鼠抑郁、焦虑模型,以行为学考察GDGSHJ的抗抑郁焦虑功效,评估其安全性,检测神经递质含量和小鼠海马体基因m RNA表达量初步解释GDGSHJ抗抑郁抗焦虑作用机制,主要实验结果如下:(1)根据逆向网络药理学以“疾病靶点-活性成分-药材”网络图思路共得到焦虑症与抑郁症交集靶点103个,PPI网络筛选出49个关键靶点,其中26个靶点可以反向映射到120种活性成分,匹配79种药食同源药材。“核心药食同源药材-活性成分-抑郁焦虑靶点”网络图分析中得出甘草、杜仲叶、大枣等10种药材中的β-谷甾醇、阿托品、光千金藤碱等活性成分可能通过作用于ADRA1B、GABRA1、SLC6A4等24个关键靶点,调节神经活性配体-受体相互作用,钙信号通路等9条通路发挥抗抑郁抗焦虑作用。分子对接结果显示10种药材中β-谷甾醇、阿托品等成分与ADRA1B、GABR1A等靶点对接稳定。(2)10种药材中具有能减轻PC12被皮质酮损伤的药材有甘草、大枣、枸杞子、桑叶、黄芪、金银花(GDGSHJ)(p<0.05),而杜仲叶、高良姜、白果、白扁豆4种药材对皮质酮诱导的PC12细胞无明显保护作用或加重细胞毒性作用。GDGSHJ总黄酮、总多酚、β-谷甾醇、豆甾醇、美迪紫檀素的含量分别为23.29±0.05 mg/g、21.44±0.27 mg/g、409.03±8.04μg/g、144.65±7.57μg/g、63.28±1.36μg/g。400 mg/L的GDGSHJ可将皮质酮诱导的PC12细胞活性提升至82.38±3.98%,LDH的活性降低至179.77±9.43 U/L(p<0.01)。PC12细胞经皮质酮刺激后凋亡率为21.23±1.37%,400 mg/L的GDGSHJ干预后降低为8.97±0.91%(p<0.01),说明GDGSHJ可通过降低神经细胞LDH漏出率和细胞凋亡率发挥神经保护作用。(3)建立CUMS应激小鼠焦虑模型,GDGSHJ灌胃干预可改善CUMS刺激引起的小鼠体重增长缓慢(p<0.01)。行为学结果显示:与CUMS模型组相比,GDGSHJ(4.42g/kg/d、8.84g/kg/d)组能显著提高CUMS小鼠的糖水偏好率,旷场实验中的运动总距离和中央区停留时间,高架十字迷宫实验闭臂上的停留次数和停留时间(p<0.05,p<0.01),以及显著减少CUMS小鼠强迫游泳和悬尾实验中不动时间(p<0.01),说明GDGSHJ具有良好的抗抑郁抗焦虑效果。Elisa结果显示,GDGSHJ灌胃给药后,相比较CUMS组,小鼠血清中5-H T和脑组织5-HT、DA、GABA含量显著升高(p<0.05,p<0.01),而对NE含量无明显影响(p>0.05),说明GDGSHJ是通过调控小鼠血清5-HT、和脑组织5-HT、DA、GABA的含量来发挥抗抑郁抗焦虑功效的。RT-PCR结果显示,小鼠经过28d的CUMS持续刺激后,海马体部位的SLC6A4、SLC6A3基因表达量显著升高(p<0.05),HTR1A、DRD1、DRD2、GABRA1基因表达量显著降低(p<0.05),而4.42g/kg/d的GDGSHJ干预后可显著逆转上述变化(p<0.05)。综上,利用网络药理学、分子对接等技术结合细胞实验筛选出来的GDGS HJ具有良好的抗抑郁抗焦虑活性且无明显的毒性作用,GDGSHJ可能通过减少LDH漏出和降低细胞凋亡发挥神经保护作用,GDGSHJ在小鼠行为学上具有良好的抗抑郁抗焦虑效果,可能通过调节小鼠海马体相关基因表达平衡血清5-HT和脑组织5-HT、DA、GABA来发挥抗抑郁抗焦虑作用,可为后续开发成缓解抑郁、焦虑的健康食品提供理论依据。