毛木耳(Auricularia polytricha)是一种具有重要营养价值和保健功能的食用真菌,在我国四川、福建等地广泛栽培。毛木耳油疤病是由子囊菌木栖柱孢霉(Scytalidium lignicola)引起的一种菌丝体侵染性病害。在前期研究中首次发现木栖柱孢霉对毛木耳菌丝体具有较强的寄主专一性。为探索木栖柱孢霉专一性侵染毛木耳菌丝体的致病机制,本文分析了木栖柱孢霉在不同培养基质上对毛木耳菌丝体的致病性、木栖柱孢霉酶类致病因子的初步探索以及毒素类致病因子的产生条件与基本特性,并对毒素类致病因子的分离纯化方法进行了摸索。研究结果如下:1.研究了毛木耳油疤病在不同培养条件下的症状表现。在装满培养料的菌袋两端分别接种毛木耳和木栖柱孢霉菌丝,菌袋中的毛木耳菌丝会被木栖柱孢霉感染而出现油疤病病斑。而在木屑平板培养料上,当两者接触后,培养皿的正面和背面均未出现油疤病病斑,但接触后的毛木耳菌丝出现变色发黄的症状;在双头试管培养料中,能观察到两者的接触部分出现油疤病病斑;在三角瓶培养料中,当两者接触后,贴三角瓶壁的部分能观察到油疤病病斑,三角瓶上面部分则仅出现菌丝变色发黄的症状。2.研究了病原菌培养液对毛木耳及其它食用菌的抑制作用。随着培养基中木栖柱孢霉浓缩培养液量的增加,对毛木耳菌丝体的抑制作用增强,当添加量为总体积的50%时,能完全抑制毛木耳菌丝的生长。同时,其对平菇、香菇、黑木耳、秀珍菇的菌丝体也有较强的抑制能力,对其它食用菌菌丝体的生长抑制能力则较弱,对猴头菇菌丝体的生长有促进作用。3.病原菌蛋白质类致病因子分析。病斑处和病原菌菌丝生长部位的水提取液对毛木耳菌丝生长具有明显的抑制作用,且水提取液灭菌后失去抑菌活性。4.病原菌毒素类致病因子分析。在液体培养条件下,CYM培养液中致病因子产量最高,最佳培养时间是8天,需持续振荡,在初始p H4~9范围内致病因子的产生不受p H值变化的影响,最佳碳源和氮源分别为葡萄糖和蛋白胨。致病因子的活性不受蛋白酶K的影响,具有较强的紫外光稳定性和热稳定性,在p H 2~10范围内活性不受p H值变化的影响,此外,致病因子的分子量小于1000、在氯仿中溶解性最好,推测致病因子中包括毒素类物质。尝试使用葡聚糖凝胶柱层析、阴离子交换树脂、阳离子交换树脂和硅胶柱层析分离毒素,均未能将毒素较好地分离开。将木栖柱孢霉毒素培养液的氯仿萃取物经过制备板薄层层析分离,得到活性组分的存在部位,继续通过制备板薄层层析分离,得到的再分离物中Rf=0和Rf=0.08条带处的组分对毛木耳生长的抑制作用最强,分别达到69.8%和63.5%。通过HPLC检验,发现Rf=0条带中的组分比较单一,最高吸收峰在1.602 min处。且Rf=0条带中的组分在紫外光220~250 nm处有强吸收。初步判断该毒素类致病因子为含有共轭两个不饱和键的酸性物质。综上所述,木栖柱孢霉对毛木耳菌丝体的致病因子包括蛋白质酶类和毒素类,毒素类物质属于酸性物质。本研究对明确毛木耳油疤病菌寄主专一性的分子基础,进一步开展病害综合防治研究,奠定了基础。