葛花异黄酮的提取、分离纯化及结构鉴定研究

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葛花(Puerariae flos)为野葛或甘葛的干花蕾,是我国的传统药物,长期以来被用于缓解酒后呕吐等症状。异黄酮类化合物,如葛花苷和鸢尾苷,是葛花的主要有效成分之一,具有解酒保肝,绝经症状的保护等作用,有很好的开发应用价值。本文以葛花为原料,研究了葛花中异黄酮的提取与纯化工艺;运用UV、IR、HPLC-MS、1H NMR和13C NMR等技术,对异黄酮单体进行了结构鉴定;以自制的鸢尾苷为标品,初步制定了葛花中总异黄酮和鸢尾苷含量限量。主要研究结果如下:1葛花异黄酮提取工艺条件的优化。采用n-正丁醇/水两相溶剂系统提取葛花总异黄酮,利用响应曲面法Box-Behnken设计对影响葛花总异黄酮提取率的主要因素(浸取时间,浸取温度溶剂组成和液固比)进行了研究,建立了相应的数学模型,优化了工艺条件:浸取时间1.30h、浸取温度70℃、n-正丁醇/水的组成1:1,液固比55:1,在该优化条件下,异黄酮提取率达96.24%,样品纯度约为73.89%。2鸢尾苷的纯化、鉴定研究。采用旋转蒸发结晶、重结晶等方法,从葛花正丁醇部位得到一种化合物,无色针状,通过理化鉴定和紫外、红外、质谱、氢谱、碳谱的分析,与文献核对,确定为鸢尾苷(C22H22O11)。经HPLC检测,纯度>99%,产率达到0.62%。该方法被用于纯化鸢尾苷,不需要柱层析纯化。方法简单、快速、产量高。3葛花药材中总异黄酮和鸢尾苷含量限量研究。本文采用理化鉴别和TLC对葛花药材进行定性研究,UV分光光度法和HPLC进行定量研究。理化鉴别表明葛花的提取液中含有黄酮类成分,TLC可检出葛花药材中的鸢尾苷;UV分光光度法测定了葛花总异黄酮含量,初步制定药材的含量不得低于4.8%;HPLC法测定了葛花总异黄酮部位鸢尾苷含量,初步制定药材的含量不得低于1.8%。为葛花药材的质量标准的制定提供了依据。
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