免疫性血小板减少症患者滤泡辅助性T细胞数量及功能的研究

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目的研究免疫性血小板减少症(immune thrombocytopenia, ITP)患者骨髓滤泡辅助性T细胞(Follicular helper T cells, Tfh细胞)数量、表面分子和淋巴转录因子Bcl-6mRNA的表达水平,并将其与临床指标间进行相关性分析,从而探讨Tfh细胞在ITP发病机制中的作用。方法选取2013年1月至2013年10月到天津医科大学总医院血液科就诊的21例初治ITP患者、20例恢复期ITP患者及18名正常对照,采用流式细胞术检测骨髓Tfh细胞数量(CD4+CXCR5+/CD4+)、Tfh细胞功能相关分子CD40LICOS、IL-21的表达,采用RT-PCR技术检测骨髓单个核细胞(BMMNC)转录因子Bcl-6mRNA相对表达水平;将CD4+CXCR5+/CD4+比值,CD4+CXCR5+ICOS+/CD4+CXCR5+比值,CD4+CXCR5+CD40L+/CD4+CXCR5+比值,CD4+CXCR5+IL-21+/CD4+CXCR5+比值,Bcl-6mRNA水平与临床指标间进行相关性分析。结果1.ITP患者Tfh细胞数量:ITP初治组骨髓CD4+CXCR5+/CD4+细胞比例[(5.532±2.599)%]高于恢复组[(4.064±2.026)%]和对照组[(4.048±1.413)%](P<0.05)。恢复组与对照组CD4+CXCR5+/CD4+细胞比例比较无显著性差异(P>0.05)。2.ITP患者Tfh细胞表面分子的表达:ITP初治组骨髓CD4+CXCR5+ICOS+/CD4+CXCR5+细胞比例[(14.586±8.561)%]高于恢复组[(12.884±10.161)%]和对照组[(7.487±5.176)%],初治组与对照组相比P<0.05,差异具有统计学意义。恢复组与对照组CD4+CXCR5+ICOS+/CD4+CXCR5+细胞比例比较无显著性差异。3.ITP患者初治组和恢复组患者骨髓CD4+CXCR5+CD40L+/CD4+CXCR5+细胞比例[(15.309±10.756)%]及[(18.242±12.243)%]高于对照组[(8.618±5.719)%](P<0.05),初诊组和恢复组比较差异无统计学意义(P>0.05)。4.ITP患者骨髓Tfh细胞胞质IL-21水平:初治组和恢复组CD4+CXCR5+IL-21+/CD4+CXCR5+细胞比例[(58.560±26.285%)]及[(57.035±30.936)%]高于对照组[(36.289±24.868)%](P<0.05),初治组和恢复组比较差异无统计学意义(P>0.05)。5.ITP患者骨髓BMMNC Bcl-6mRNA表达水平比较:初治组、恢复组、正常对照组三组Bcl-6mRNA的表达水平分别为(1.407±0.264)、(1.149±0.217)和(0.846±0.157),初治组高于恢复组和对照组,恢复组高于对照组,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。6.ITP患者骨髓CD4+CXCR5+/CD4+细胞比例与Bcl-6mRNA水平成正相关(r=0.395,P值<0.05),与发病时血小板数成负相关(r=-0.362,P值<0.05),与髂骨不产板巨核细胞比例成正相关(r=0.416,P值<0.05),与血清IgA水平成正相关(r=0.504,P值<0.05),与血CD3+CD4+/CD3+CD8+细胞的比例成正相关(r=0.491,P值<0.05)。骨髓CD4+CXCR5+ICOS+/CD4+CXCR5+细胞比例与CD5+CD19+/CD19+细胞比例成正相关(r=0.365,P值<0.05)。结论:Tfh细胞在ITP患者的骨髓中数量增加,功能分子表达增多,功能亢进,可能导致了B细胞产生抗血小板自身抗体增加,血小板破坏增多,从而在ITP的发病机制中起到重要作用。ITP患者Tfh细胞数量与ITP疾病的严重程度密切相关。抑制Tfh细胞相关分子如CD40L、IL-21和ICOS等的表达将有望成为ITP新的治疗靶点。
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