Th17细胞在免疫性血小板减少症患者数量及功能研究

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目的:免疫性血小板减少症(immune thrombocytopenia, ITP)是临床上最常见的出血性疾病,其免疫发病机制复杂。辅助性T细胞17型(T helper cells type17,Thl7细胞)是近年来新发现T细胞亚群,已有研究发现Th17细胞在系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等自身免疫性疾病的发生发展过程中起重要作用。本实验主要研究免疫性血小板减少症患者Th17细胞数量、相关功能分子水平及其与临床指标的相关性,探讨Th17细胞在ITP发病机制中的作用。方法:选取2013年1月至9月于天津医科大学总医院血液住院ITP患者40例,初治患者26例,恢复组患者14例;另选取同期正常对照14名。应用流式细胞术(Flow cytometry, FCM)检测骨髓单个核细胞(Bone marrow mononuclear cells, BMMNC)中白细胞介素23受体(Interleukin-23Receptor, IL-23R)+CD4+/CD4+细胞比例;应用酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked Immunosorbent assay, ELISA)法检测骨髓上清液IL-17、IL-23水平;逆转录聚合酶链反应(Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction, RT-PCR)法测定BMMNC中白细胞介素17(Interleukin-17, IL-17) mRNA的相对表达水平。分析IL-23R+CD4+/CD4+细胞与IL-17、IL-23及IL-17mRNA的相关性,并且分析它们与临床指标的相关性。结果:1.ITP患者BMMNC中IL-23R+CD4+/CD4+细胞比例[(4.933±6.162)%]明显高于正常对照[(0.897±0.803)%](P<0.05);ITP患者骨髓上清液中IL-17水平[(13.434±7.189)ng/L]明显高于正常对照[(4.134±2.879ng/L](P<0.05);ITP患者骨髓上清液中IL-23水平[(56.930±58.512)ng/L]明显高于正常对照[(17.841±11.033)ng/L](P<0.05);ITP患者BMMNC IL-17mRNA相对表达水平[0.921±0.196]均明显高于正常对照[0.749±0.136](P<0.05)。2.ITP初治组患者BMMNC IL-23R+CD4+/CD4+细胞比例[(6.699±7.008)%]明显高于恢复组[(1.656±1.286)%](P<0.05);ITP初治组患者骨髓上清液IL-17水平[(16.021±7.114)ng/L]明显高于恢复组、[(7.972±3.326) ng/L](P<0.05); ITP初治组患者骨髓上清液IL-23水平[(72.474±64.835)ng/L]明显高于恢复组[(24.114±17.654)ng/L)](P<0.05);ITP初治组患者BMMNC IL-17mRNA相对表达水平[0.967±0.186]明显高于恢复组[0.801±0.163](P<0.05)。3.ITP患者骨髓IL-23R+CD4+/CD4+细胞比例与IL-17、IL-23、IL-17mRNA均呈正相关(r=0.833、0.526、0.744,P<0.05)。4.与其临床指标存在相关性。ITP患者IL-17、IL-23、IL-17mRNA与髂骨不产板巨核细胞计数(r=0.466、0.557、0.390,P<0.05)呈正相关;ITP患者Th17细胞比例、IL-17、IL-23、L-17mRNA与免疫球蛋白A(r=0.449、0.374、0.510、0.453,P<0.05)呈正相关;ITP患者IL-17、IL-23、IL-17mRNA与血小板计数呈负相关(r=-0.385、-0.397、-0.362,P<0.05)。结论:1.Th17细胞数量及其功能分子水平在ITP患者增加。2.初治组ITP患者Th17细胞数量及相关功能分子明显高于恢复组。3.Th17细胞在一定程度上与疾病严重程度呈正相关。
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