弓形虫和旋毛虫分子检测方法的建立

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:a429629261
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
旋毛虫和弓形虫是两种主要的食源性寄生虫病病原体。旋毛虫主要寄生于肌肉组织;弓形虫则多寄生于脑、淋巴结和肝脏组织。误食受到污染的食物和感染的肌肉组织是两种寄生虫感染宿主的主要方式。为了建立针对旋毛虫和弓形虫的分子检测方法,为弓形虫病和旋毛虫病防控提供合适的检测工具,本研究对两种虫体的常规PCR、Real-time PCR、LAMP三种检测方法进行了研究。  第一部分根据已发表的弓形虫特异性和敏感性得到证实的529 bp高拷贝序列,设计特异性引物和探针,建立TaqMan探针法的实时荧光定量PCR检测方法;并利用纯化虫体DNA、750份临床样本和与基于靶基因建立的常规PCR和LAMP进行比较。结果发现Real-time PCR、LAMP和常规PCR的检测模板浓度下限依次为:1 fg/μL、10 fg/μL和100 fg/μL。结果表明,real-time PCR灵敏度最高,LAMP次之。  第二部分根据对旋毛虫11个基因型的核糖体大亚基基因(ls rDNA)序列比对分析,选择其中的种内特异性保守区片段作为靶基因,建立了real-time PCR、LAMP和常规PCR三种分子检测方法。结果显示,三种检测方法的特异性均非常好,检测模板浓度下限分别为:10 fg/μL、100 fg/μL和1 pg/μL。其中real-time PCR灵敏度最高,LAMP次之。此外,采用real-time PCR检测方法定量检测旋毛虫感染小鼠各组织中虫体的拷贝数,结果显示检测取样最好的靶组织是膈肌。以膈肌作为检测对象进行流行病学调查,结果显示集约化养猪场猪旋毛虫的感染率为6.8%,散养猪的感染率高达20%。
其他文献
喹赛多作为喹嗯啉类新药,对畜禽及水产品中常见病原菌有良好的抑菌作用,并且能够提高饲料转化率,促进机体生长。与同类药物相比,喹赛多具有安全性更高、毒副作用更低的特点。
将经过预饲一周的艾维茵肉鸡300羽随机分成四组,在玉米-豆粕-菜饼型的基础日粮中分别添加不同水平的氯羟吡啶(从第Ⅰ到第Ⅳ组分别添加0mg/kg、125mg/kg、600mg/kg、1000mg/kg
我们常常听说,半路杀出个程咬金!说的意思就是半途中被意料不到的对手抢了先机.其实对程咬金这个历史人物了解的人都知道,在《隋唐演义》中,混世魔王程咬金有三招杀手锏劈、
对北京地区红脂大小蠹Dendroctonus valens LeConte空间分布型进行了研究。结果表明红脂大小蠹成聚集分布,其聚集原因是由红脂大小蠹本身的聚集行为或聚集行为与环境的异质性
过氧化物酶体增殖因子活化受体(peroxisome proliferator-activated receptors,PPARs)是配体依赖的转录因子的核受体超家族成员,由PPARα、PPARγ和PPARδ三个成员组成.该实验
近年来,中国食品安全问题已经引起了国内外的高度关注。今年的“三鹿奶粉事件”祸首在于向奶中加入了三聚氰胺,改变了牛奶的“天然”组成。业内专家指出,在粮食生产及加工、包装和经营过程中,会产生多种形式的食品安全问题,如细菌、寄生虫、病毒和真菌及其产生的毒素所造成的微生物性危害,环境中自身有毒物质砷、氰化物等产生的危害,有毒化学工业品或放射性废弃物或其他潜在的污染源对食品造成的污染等等。从农业生产来说,过
安徽是中国淡水养殖大省,但长期以来水产动物病原学研究比较落后,鱼、鳖、蟹等水产动物的细菌性传染病常有发生,成为制约水产养殖业发展的重要因素.近年来,该实验室先后从省
福柯的学术研究于在70年代后期发生了伦理谱系学转向,这是福柯主体之思的逻辑必然,而其成果是生存美学。通过生存美学,福柯重新实现了对主体的建构,但这并不意味着他否定了以
见到胡安军,是在他位于上海浦东新区汤臣中心的办公室里,不大的办公室,员工们都在各自忙碌着.
在现代集约化养禽业中,饮食、环境、管理和疾病等相关因素可单独或联合作用于禽的抗氧化系统和免疫系统,引起氧化应激和免疫抑制。氧化应激会引发禽的多种疾病,如囊包性纤维症、