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目的高氧机械通气治疗是临床中抢救危重病人最有效的方法之一,然而长时间持续吸入高浓度氧可导致肺氧化应激性损伤,目前对高氧肺损伤的发病机制尚未完全清楚,因而临床上尚无确定有效的防治方法。高氧肺损伤的一个重要组织学特点是细胞凋亡。c-Jun氨基末端激酶(C-Jun NH2-terminal kinase ,JNK)信号转导通路是丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase, MAPKs)家族中的重要通路之一,对细胞的凋亡调节发挥着重要作用。本课题采用幼鼠建立高氧肺损伤动物模型,观察高氧下肺组织细胞凋亡及JNK信号转导通路激活的时空分布特征,并探讨JNK信号通路对高氧诱导的肺细胞凋亡的影响,从而研究JNK信号转导通路在高氧肺损伤中的作用。方法3周Wistar大鼠48只采用随机图标法分为6组,每组8只:空气对照组、高氧暴露3天组、高氧暴露7天组、高氧暴露14天组、空气+SP600125干预组、高氧暴露7天+SP600125干预组。高氧组持续吸入高浓度氧(O2>95%),空气对照组置于室内空气中(O2≈21%)。SP600125干预组动物经腹腔注射SP600125 30mg/kg,2h后再予高氧或空气暴露。采用肉眼及苏木精和伊红(Hematoxylin and eosin ,HE)染色光镜下观察肺组织病理学变化,末端标记法( Terminaldeoxynucleotidyltransferase-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)分析肺组织细胞凋亡的变化,免疫组化检测肺组织磷酸化-JNK(p-JNK)的表达和分布,蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测肺组织p-JNK蛋白质的含量。结果肺组织病理学改变表现为高氧3天时肺组织充血、水肿、出血和炎性细胞浸润,高氧7天时上述改变更加明显,高氧14天时则肺组织充血水肿减轻,间质增厚,成纤维细胞增生明显。TUNEL分析表明空气对照组肺组织中少见凋亡细胞,而高氧暴露3天、7天、14天组肺组织中可见大量的凋亡细胞(P<0.05),尤以高氧暴露3、7天明显;凋亡细胞以肺泡上皮细胞、小气道上皮细胞及血管内皮细胞为主,部分巨噬细胞、间质细胞、浸润的炎症细胞也呈凋亡改变。免疫组化结果提示空气对照组偶有少量p-JNK阳性表达,而高氧暴露组则p-JNK阳性表达显著增多,以高氧7天组增多最为明显;阳性细胞广泛分布于肺泡上皮细胞、小气道上皮细胞、血管内皮细胞、巨噬细胞、间质细胞以及浸润炎症细胞。Western blot结果显示空气对照组仅有少量p-JNK蛋白表达,高氧暴露3天、7天、14天组p-JNK蛋白表达含量明显增加(P<0.05),以在高氧7天组增加最为明显。在空气和高氧暴露7天,SP600125干预后肺组织p-JNK蛋白表达含量较相应未干预组均出现明显抑制(P<0.05),且在高氧暴露7天,SP600125干预后显著减少了肺组织细胞的凋亡(P<0.05)。结论1.我们成功复制出高氧性肺损伤动物模型。2.高氧在肺损伤的急慢性阶段可诱导肺组织细胞发生凋亡,细胞凋亡是高氧肺损伤的一个重要病理组织学特点。3. JNK信号转导通路在高氧肺损伤中被激活,可能参与了高氧肺损伤的发病机制并介导了其发生、发展。4. JNK信号转导通路参与介导了高氧下肺细胞凋亡的信号转导,发挥促细胞凋亡效应。阻断或抑制JNK信号通路,有可能起到肺损伤保护作用。