芍药遗传多样性研究与赤霉素解除休眠的机理探讨

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芍药(Paeonia lactiflora Pall.)为芍药科(Paeoniaceae)多年生宿根植物,是深受我国人民喜爱的传统名花。目前国内外培育的芍药品种已逾千个,变异类型非常丰富,但因缺乏相应的亲本信息,致使无法全面了解各品种的遗传背景。本研究通过染色体核型鉴定和SSR分子标记技术,对不同芍药品种群的品种遗传多样性进行了研究,为芍药的品种分类、品种选育以及种质资源利用提供科学依据。另一方面,在芍药促成栽培时,生产上广泛利用GA3打破休眠,但对促进芍药花芽休眠解除的分子机理尚未见报道。本研究从形态学、生理学和分子生物学角度探讨了不同GA3处理方式对芍药花芽形态分化、生理生化代谢、GID1受体基因和DELLA蛋白基因表达模式的影响,探讨芍药花芽休眠解除过程的生理与分子机制,为芍药的花期调控和分子育种提供理论指导。本研究主要成果如下:1、不同芍药品种群品种的染色体核型鉴定:对21个倍性未知的品种进行了染色体核型鉴定。结果显示:中国芍药品种群的品种为二倍体,伊藤芍药品种群的5个品种为三倍体,杂种芍药品种群中的15个品种倍性多样,出现了二倍体、三倍体及四倍体的分化。2、SSR分子标记筛选与遗传多样性分析:从100对引物中筛选出13对多态性引物,总计得到86个等位位点(76个多态性等位位点),每对引物平均扩增6.615位点。有效等位位点变化范围为2.243-7.800,PIC含量的变化范围为0.554-0.872,遗传多样性指数变化范围为1.701-3.126。通过UPGMA法构建了 55个芍药品种的聚类图,55个品种被划分为9个小组。3、外源喷施GA3对芍药’大富贵’花芽分化的影响:将进入花瓣原基阶段的植株移入冷库,同时喷施150 mg/L的外源GA3。结果显示:GA3对芍药的花芽分化进程影响十分显著,花芽分化周期极大缩短,入冷库前喷施150 mg/L外源GA3的植株仅需25 d就能迅速从花瓣原基阶段分化到雌蕊原基阶段,比对照组提前了 40 d。4、芍药花芽休眠解除过程中的生理代谢研究:可溶性糖、淀粉和可溶性蛋白含量等10个生理指标在芍药花芽休眠解除期间均呈一定的规律性变化。芍药花芽休眠解除时,可溶性糖和淀粉含量、SOD和PDO酶活性呈现下降趋势,CAT酶活性呈现上升趋势。GA3和GA3/ABA的比值在芍药花芽休眠解除时均呈上升趋势,GA3/ABA的比值基本能够反映芍药花芽休眠解除的趋势。5、GID1受体基因和DELLA蛋白基因表达模式的探索:从本课题组已有转录组数据中筛选出2个GID1受体基因PlGID1a和PlGID1b,3个DELLA蛋白基因PlDELLA1、PlDELLA2和PlDELLA3。根据结果推测较高表达量的GID1(PlGID1a和PlGID1b)受体基因,较低表达量 DELLA(PlDELLA1、PlDELL APlDELLA3)蛋白会促进芍药花芽休眠解除。由于PlGID1a和PlDELLA2的基因表达量差值相对较大,推测PlGID1a和PlDELLA2是GID1受体基因和DELLA蛋白中的关键基因。
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