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近年来,随着新型免疫抑制药物的问世及组织配型技术的精进,移植外科发展迅猛,整形外科医生也加强了在异体复合组织移植领域的探索。然而,CTA移植的发展远远滞后于内脏器官移植,究其根本,是因为其组分复杂,抗原性不均一。自1998年Dubernard首次成功实施手移植以来,截止07年全球已完成20例手移植, 8例换脸。据文献回顾,法国的第一例CTA受者在术后发生过2次急性排斥反应,本研究所实施的第二例患者也发生了3次急排。在加大免疫抑制剂用量后,排斥反应均得到控制,但代价却是各种棘手的并发症,急性肾衰、高血压症、高血糖、白细胞减少症等等。因此,如何最小化免疫抑制剂应用的风险,已成为CTA移植领域的重中之重。异体复合组织移植排斥反应的发生遵循着免疫应答的一般规律,即首先对外来的同种异体抗原进行免疫识别,继而进入活化阶段,最终产生对移植物的免疫排斥,因此,选择性阻断其中任一环节,均有可能诱导移植免疫耐受。树突状细胞是最主要的抗原提呈细胞,其表面高水平表达MHC-II类分子以及共刺激分子CD80、CD86,通过第二信号刺激途径,激活初始T细胞。但是在它成熟之前,这些分子呈低表达,以吞噬功能为主,提呈功能为辅,甚至可以诱导T细胞凋亡或者无能。因此,未成熟树突状细胞是细胞回输治疗方案理想的备选细胞。目的:利用CTA移植物位于体表,耐缺血时间长的优势,利用术中、术后两个时间窗,提出局部细胞治疗诱导免疫耐受的新理念,降低全身免疫抑制剂应用为同种异体复合组织移植带来的风险。方法:1.贴壁培养法体外诱导未成熟树突状细胞,进行形态学鉴定、活性及表型鉴定,最后通过体外鉴定其免疫学功能。2.体内试验分别研究供、受双方来源的imDC,局部回输或联合应用低剂量雷帕霉素对异体皮瓣存活的影响。结果:1.光镜可见细胞呈葡萄串样生长,电镜下可看到细胞表面皱褶多、短刺状突起少,胞内可见丰富的细胞器及吞噬泡。活细胞率(91.13±1.25)%,纯度(61.10±1.47)%,OX62阳性细胞表面CD80、86、MHC II呈低表达。抑制功能试验表明imDC不具备直接刺激T细胞活化扩增的能力。单向混合淋巴细胞反应,观察到imDC下调了T细胞活化扩增的能力。2.供体imDC回输组最先发生急排,病理分析符合急排的病理特点。受体imDC回输联合低剂量雷帕霉素用药后,皮瓣成活期延长至20余天,较雷帕霉素单独处理组长,病理分析见皮肤、皮下以及血管周围组织炎性细胞浸润均明显增多。排斥终点各组受鼠脾脏、淋巴结内Treg含量检测,供体imDC回输组最低,受体imDC回输联合雷帕霉素组最高,但均较正常组明显降低,与排斥发生急缓呈现良好的相关性。结论:1.体外诱导的未成熟树突状细胞具备低免疫原性,可下调T细胞的活化增殖。2.受体imDC联合低剂量雷帕霉素用药可延长异体皮瓣存活时间,可能与刺激Treg体内扩增有关,为今后自体imDC及Treg联合回输奠定了基础。