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卵泡抑素(Follistarin,FS),是一种单链糖蛋白,其mRNA在动物体内多种组织和器官中均有表达。FS可作为激活素(Activin,ACT)的结合蛋白,通过Follistarin/Activin系统来调节动物的生殖活动。同时,对体内不同类型的细胞具有广泛的调节功能,而表现出多方面的生物学作用。 本研究根据GeneBank(NCBI)中的FS基因编码区序列,设计并合成了一对特异性引物。上游引物:5′-ATGGTCCGTCCCAAGC-3′,对应于FS基因编码区第1-16位核苷酸;下游引物:5′-TTACCACTCTAGAATAGAAGATATAGG-3′,对应于FS基因编码区第1008-1035位核苷酸。以巴马小型猪的卵巢组织总RNA为模板,利用M-MLV反转录酶,通过反向聚合酶链式反应(RT-PCR)从猪卵巢的mRNA中扩增出相应的cDNA片段。该扩增片段经纯化后,连接到pMD18-T载体上扩增测序。结果表明:克隆的巴马小型猪FS cDNA序列全长为1035bp,与GeneBank中报道的家猪FS同源性高达99.4%,与奶牛、家鼠、挪威鼠和马等其他物种的FS cDNA序列间同源性也大于89%,证明已成功地克隆到FS基因编码区序列。 使用添加酶切位点的引物,经PCR扩增获得FS基因,用BamH l