Interferonα和p14ARF增强骨肉瘤细胞化疗敏感性及其机理研究

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本课题探讨了Interferona和p14ARF基因转染对骨肉瘤U120S和MG3细胞化疗敏感性的影响,并深入研究其分子作用机制,以期为克服骨肉瘤对化疗耐药和探索提高骨肉瘤化疗敏感性的新方法提供理论和实验依据。文章采用IFNα或稳定转染p14ARF真核表达质粒与化疗药物联合处理人骨肉瘤细胞株U20S(含有野生型p53基因)和MG63(含有突变型p53基因),使用噻唑蓝(MTT)方法检测药物的细胞毒作用,流式细胞术(FACS)、倒置光学显微镜、Hoechst 33258荧光染色、DNA Ladder、Caspase-3活化和PARP裂解等方法检测细胞凋亡,采用Western blot法检测p53、STAT1、p21、p14ARF、Bax、Bcl-2、Mdm2、Fas、Caspase-3、8、9、PARP和GADPH蛋白表达,RT-PCR法检测p53的mRNA水平表达,通过mRNA干扰进行p53和STAT1的表达沉默。采用SPSS12.0软件进行统计分析,组间差异采用t检验。
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