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1-脱氧野尻霉素(DNJ)是一种哌啶生物碱,具有抑制葡萄糖苷酶,从而抑制糖吸收、降低餐后血糖、抗肿瘤转移、抗病毒等作用。目前,DNJ的来源多是桑树提取物,但其产量不高,而化学合成方法工艺复杂。基于此问题,本研究筛选出一株产DNJ的细菌菌株,对其进行了鉴定,优化了该菌株产DNJ的发酵条件和培养基,利用脱脂蚕蛹粉制备蚕蛹蛋白胨来替代市售蛋白胨用于发酵罐扩大发酵。利用琼脂平板法和反相高效液相色谱法从桑园土壤中筛选产DNJ菌株,281个菌株中筛选出一株产DNJ的细菌菌株,其产量约为80.22mg/L,并命名其为WB-1。对筛选出的细菌菌株WB-1进行了生理生化和分子生物学鉴定。菌落呈米白色,菌落表面湿润、光滑,边缘整齐,微隆起。菌株属于好氧菌,无运动性,能水解利用淀粉,能利用柠檬酸盐作为单一碳源,能分解过氧化氢,不产H2S,明胶液化、苯丙氨酸脱氨酶以及甲基红试验都呈阴性。利用PCR法扩增了16srDNA片段,序列测定后检索NCBI数据库,序列与球形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus sphaericus)亲缘关系最近,因此确定我们分离的菌株WB-1为赖氨酸芽孢杆菌。对该菌株的生长曲线进行了测定,得出其各个生长阶段分别为:0~4h处于迟滞期,4~14h处于对数期,14~22h处于稳定期,22h以后进入衰亡期。利用单因素实验确定了摇瓶发酵的条件及其培养基组成的基本成分。摇瓶发酵条件为:发酵温度为30℃,发酵初始pH为6.5,摇床转速为180rpm,装液量为30mL,发酵时间2d。通过PB试验、Box-Behnken试验设计依次对菌株WB-1发酵产DNJ的培养基和培养条件进行了多因素优化,得到优化后的条件为:葡萄糖0.5%、蔗糖0.3%、牛肉膏0.5%、蛋白胨0.795%、MgSO40.255%、NaCl0.05%,装液量38mL,在此条件下进行发酵可得DNJ产量为184.95mg/L,所得的DNJ产量较优化前的基础性培养基提高了1.31倍。酶解脱脂蚕蛹粉制备蚕蛹蛋白胨,将其与市售蛋白胨复合培养菌株WB-1,结果发现蚕蛹蛋白胨的添加能延缓该菌株进入衰亡期。利用自制蚕蛹蛋白胨替代蛋白胨进行DNJ发酵试验,确定了其添加量为0.75%。将菌株WB-1进行5L发酵罐的放大发酵试验,每隔一定时间取适量发酵液,分别测定发酵液的OD600值以及DNJ含量,绘制其在发酵罐内培养时的生长曲线图以及不同发酵时间时DNJ产量的变化图,结果表明当发酵50h时进行放罐,可获得较高的DNJ产量。