海洋细菌在海洋生态系统中扮演着极为重要的角色,海洋中各种循环和能量流动、有机物质的合成和分解等都离不开细菌的参与。海水浴场作为一种旅游资源,浴场水体环境质量,尤其是水中细菌及致病菌的含量对旅游者的旅游体验、身体健康、甚至生命安全都有着十分重要的影响。所以,研究海水浴场水体中细菌群落的组成和多样性具有十分重要的意义。本研究以秦皇岛市的东山浴场、老虎石浴场、南戴河浴场、西浴场四个浴场为研究对象,分别于2014年6月-2015年4月期间进行了样品采集工作,并采用传统平板培养和荧光定量PCR技术相结合的方法研究分析了这四个浴场海水中细菌群落的多样性和季节变化。秦皇岛四个海水浴场水体中的细菌总数的变化会受到温度、降雨、游客数量等因素的影响,同时细菌总数的骤增还可能与浴场附近排污口集中排污有关,所以细菌总数的峰值主要出现在夏季高温时、降雨后、游客数多时以及浴场周边排污口大量排污时段。可培养细菌多样性的分析结果表明:秦皇岛四个浴场夏季海水中可培养细菌主要分属于变形菌门(α-、β-、γ-变形菌纲)、厚壁菌门(芽孢杆菌纲)、拟杆菌门(黄杆菌纲)和放线菌门(放线菌纲),在门(纲)水平上的细菌结构差异不大。序列比对后发现这四个浴场海水中存在大量大肠杆菌、副溶血弧菌、蜡样芽孢杆菌、阪崎肠杆菌、溶藻弧菌等致病菌。此外,这四个浴场海水中还有一部分细菌为Unclassified类群,说明秦皇岛海水浴场水体中依然存在很多未知的海洋新种,值得进行进一步研究探索。实时荧光定量PCR实验的定量结果显示,与海洋中碳、氮、硫循环密切相关的α-变形菌纲、蓝细菌门、拟杆菌门和厚壁菌门类群细菌的丰度在考察的两个浴场中均表现为夏季时最高,此时海水温度较高,细菌新陈代谢活动旺盛,生长繁殖较快,所以丰度较高;β-变形菌纲和放线菌门类群细菌的丰度在老虎石浴场表现为冬季时最高,推测可能受到了老虎石浴场周围排污口冬季集中排污的影响。通过对东山浴场和老虎石浴场四个季节各菌门(纲)丰度变化的分析发现,细菌群落构成和丰度会随季节变化而发生一定变化。基于可培养细菌多样性的研究结果,对秦皇岛四个海水浴场水体中大肠杆菌、副溶血弧菌、蜡样芽胞杆菌三种优势致病菌进行了研究。快速检测方法建立在特异性显色培养基的基础上,选择通过用灭菌海水来配制使其营养环境更接近海水条件,从而使计数结果更可靠。通过对这三种致病菌的长期监测,发现浴场海水中大肠杆菌和副溶血弧菌数量表现为夏秋季(旅游高峰期)较高,冬春季较低,其变化与温度和游客数量有关;而蜡样芽孢杆菌数量表现为夏冬两季较多,春秋两季较少,除了受温度调控外,其冬季数量变化可能是受周围排污口排污的影响更大;此外,降雨也是影响这三种致病菌数量的因素之一,在降雨后,三种致病菌数量均产生了不同程度的增长。基于研究结果,建议秦皇岛海水浴场相关管理部门将细菌总数、大肠杆菌、副溶血弧菌、蜡样芽孢杆菌的监测加入到日常监测中,并加强雨后对海水浴场致病菌污染情况的监测,在旅游高峰期(主要是夏季及秋季初期)适当控制浴场游客数量,同时严格控制浴场周围排污口排污,通过这些举措进一步改善秦皇岛海水浴场的水体水质,为浴场游客提供更为舒适安全的海水环境。