研究背景及目的:闭塞性细支气管炎综合征（Bronchiolitis obliterans syndrome,BOS）是异基因造血干细胞移植（Allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT）晚期发生的以细支气管周围胶原沉积导致肺功能进行性下降为特点的一种非感染性肺部并发症,是肺慢性移植物抗宿主病（Chronic graft versus host disease,cGVHD）的唯一特征性表现。目前,BOS尚缺乏有效的治疗措施,需要建立合适的动物模型以更好地研究BOS的发病机制。肺泡巨噬细胞形成泡沫细胞在慢性肺纤维化疾病中是常见的病理特征,但其在allo-HSCT后BOS发病机制中的作用尚不清楚。另外,我们的前期实验结果显示间充质干细胞（Mesenchymal stem cells,MSCs）对cGVHD的治疗有效,因此,我们设计了一项前瞻性多中心研究,评估MSCs治疗allo-HSCT后BOS的疗效和安全性。方法:通过致死剂量全身放疗后尾静脉回输供鼠骨髓和低剂量脾细胞的方法,建立allo-HSCT后BOS小鼠模型。通过观察组织病理、肺组织羟脯氨酸含量、小鼠肺功能检测验证模型。通过免疫组化、免疫荧光、流式细胞学、Western blotting等方法,观察BOS小鼠肺组织内泡沫细胞数量和表型变化及其可能机制。根据患者的意愿将来自六个移植中心的81例allo-HSCT后BOS患者分为两组:MSC组给予泼尼松和阿奇霉素联合静脉MSCs,非MSC组仅给予泼尼松和阿奇霉素,观察MSCs治疗对患者肺功能的影响和安全性。结果:1.allo-HSCT后cGVHD BOS小鼠模型的构建:给予脾细胞1×106的受鼠在移植后+30天左右逐渐出现cGVHD症状。在移植+60天,细支气管周围出现炎性细胞浸润、胶原沉积、管壁增厚。肺功能显示气道阻力升高,顺应性下降。肺羟脯氨酸含量升高符合纤维化表现。肝、皮肤、唾液腺也有不同程度的cGVHD病理改变。2.肺泡巨噬细胞形成泡沫细胞参与allo-HSCT后BOS的发生:AMs在移植后+21天开始数量增加,浸润至细支气管周围,油红O染色显示AMs吞噬脂质后形成泡沫细胞。泡沫细胞的免疫表型向“M2”型巨噬细胞转变,TGF-β表达量增加,参与BOS的发生。3.BOS致Clara细胞损伤导致泡沫细胞形成:Clara细胞是肺内cGVHD同种异体免疫反应攻击的靶细胞,泡沫细胞驱动BOS肺纤维化的发生,Clara细胞功能受损诱导AMs吞噬形成泡沫细胞。4.MSC治疗allo-HSCT后BOS的临床研究:35/49名患者（71%,95%置信区间[C onfidence interval,CI]59-84%）接受MSCs的患者在治疗3个月达到反应标准,而14/32（44%,95%置信区间27-61%）没有接受MSCs治疗的患者达到此治疗反应标准（P=0.013）。MSC组的总体生存率显著高于非MSC组,MSC组的3年生存率估计值为70.6%（95%CI 55.9-85.3%）,而非MSC组为58.2%（95%CI 36.1-78.5%）（log-rank P=0.023）。多剂量 MSCs 输注耐受性良好,不增加患者感染和原发疾病复发的风险,并且允许降低全身性使用激素的剂量。结论:使用简化的预处理方案建立了 allo-HSCT后BOS小鼠模型,为进一步深入研究allo-HSCT后BOS的发病机制打下基础。AMs形成泡沫细胞促进allo-HSCT后BOS的发展,旨在阻止泡沫细胞形成的策略可能对限制BOS的发生和/或发展有效。MSCs联合阿奇霉素和糖皮质激素对于控制allo-HSCT后BOS患者的肺功能下降具有临床益处。