肿瘤是一种病理性免疫耐受性疾病,肿瘤细胞往往可以利用机体复杂的异常失活或过度失活的免疫反应而获得免疫逃逸,进而得以持续生长和发生远处转移。近年来研究发现肿瘤细胞能够内化活的免疫细胞形成异质性cell-in-cell结构（heterotypic cell-in-cell,heCIC）,免疫细胞（如 NK、CTL 细胞等）与肿瘤细胞可以利用免疫微环境的适应性特性,影响免疫自稳、肿瘤的发生发展以及肿瘤进化等多个生物学过程。Cell-in-cell结构（CIC structure,CICs）形成过程中,免疫细胞进入肿瘤细胞内部是一个主动过程,进入肿瘤细胞后免疫细胞的命运决定着肿瘤免疫调节的方向。目前已知的CICs有两类,除异质性CIC（heCIC）结构外还有同质性CIC（homotypic CIC,hoCIC）结构,即同种或异种肿瘤细胞之间形成的CICs。既往研究表明影响hoCIC形成的关键因素包括:E-钙黏蛋白介导的细胞间黏附连接和RhoA-ROCK-MLC信号通路的活化,而影响heCIC形成的具体机制尚待进一步研究。本研究通过对不同同源PLC/PRF/5单克隆细胞株分析,建立heCIC结构模型,利用基因芯片分析筛选出关键分子GOLM1。通过调节GOLM1在肿瘤细胞中的表达水平来检测heCIC的形成。结果提示降低GOLM1表达可促进heCIC的形成,而过表达GOLM1后抑制heCIC的形成。之后的实验发现,GOLM1与E-cadherin的表达量负相关,且发生在溶酶体通路,回升E-cadherin可有效提高heCIC的形成。体内外生物学功能研究发现,heCIC的形成可以产生肿瘤细胞免疫调节作用,提高heCIC的形成可以增强NK细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。为进一步明确CIC结构与肿瘤患者临床预后与病理分型之间的关系,我们利用“EML”（E-cadherin、CD68和CD45）多色免疫荧光技术,对肿瘤组织芯片（TMA）进行分析并鉴定出不同CIC亚型,将不同CIC亚型同临床病理资料相结合进行单因素及多因素生存分析。结果表明,CIC结构及其亚型不仅显示出与TNM分期和癌症分型等传统病理参数相当的预后能力,甚至新亚型MiT对肿瘤患者临床预后分析具有更优越的价值。综上所述,本研究通过对heCIC形成的关键分子GOLM1进行验证和分析,发现GOLM1对heCIC的形成具有负向调控作用。并明确了 GOLM1调节heCIC的形成机制,即GOLM1通过的调节E-cadherin的表达量而影响heCIC的形成,这一过程和溶酶体通路相关。本研究进一步发现GOLM1通过调节heCIC的形成影响免疫细胞对肿瘤细胞的杀伤效力,CIC在此过程中贡献了一定的作用,增强了 NK细胞对肿瘤的杀伤作用。并且我们首次将CIC结构结合到TMA进行系统性预后分析,并提出了“功能性病理”这一新诊断指标,经验证CIC亚型应用于肿瘤患者临床预后判断具有极高的敏感性和特异性,是一种优越的生物学指标。我们的研究有望为肿瘤免疫治疗、临床诊断及预后分析提供新的靶点和策略。