论文部分内容阅读
背景与目的：肾细胞癌（又称肾癌，RCC）对放、化疗不敏感，且缺乏用于早期诊断的肿瘤标记物，是其病死率高的主要原因。微小RNA（microRNA，miRNA，miR）在人类肿瘤中广泛差异性表达，因其具有类似癌基因和抑癌基因的功能而备受关注。研究表明miRNA具有成为肿瘤诊断和治疗特异性标志物的潜能。MicroRNA-199a-3p（miR-199a-3p）在人类多种肿瘤中差异性表达，且具有一定的抑癌或致癌作用。然而，到目前为止尚没有关于miR-199a-3p在肾癌中的表达及作用的研究。本研究旨在检测miR-199a-3p在肾癌细胞株和肾癌组织中的表达，分析miR-199a-3p的表达水平与肾癌患者生存之间的关系，并探究miR-199a-3p在肾癌细胞中的作用。研究方法:利用实时定量RT-PCR检测miR-199a-3p在肾癌细胞和肾癌组织中的表达水平；结合肾癌患者的随访资料，采用Kaplan-Meier生存分析法分析肾癌组织中miR-199a-3p表达水平与肾癌患者生存之间的相关性；利用miR-199a-3p模拟物转染肾癌细胞786-0、Caki-1上调miR-199a-3p后，通过CCK-8、克隆形成、transwell以及细胞周期、凋亡检测来探究其在肾癌细胞中的作用。研究结果:与肾细胞HK-2相比，miR-199a-3p在肾癌细胞786-O和Caki-1中明显低表达（P<0.01）；与配对的癌旁组织相比，miR-199a-3p在76.7%（23/30）的肾癌组织中明显低表达；Kaplan-Meier生存分析表明miR-199a-3p低表达的肾癌患者具有更差的生存期（P<0.05）；体外功能学实验表明上调miR-199a-3p可显著抑制肾癌细胞786-O、Caki-1的增殖（48h：786-O P=0.021、Caki-1P=0.032；72h：786-O P=0.015、Caki-1P=0.028；96h：786-O P=0.000、Caki-1P=0.000）、存活（786-O：P=0.000；Caki-1：P=0.000）和侵袭（786-O：P=0.004；Caki-1：P=0.006），并能诱导细胞周期G1期阻滞（786-O: P=0.012；Caki-1: P=0.001）。结论:我们的研究显示在肾癌细胞和组织中miR-199a-3p明显低表达，miR-199a-3p的表达水平与肾癌患者的预后相关，miR-199a-3p在肾癌中具有一定的抑癌作用。上述发现表明miR-199a-3p具有作为肾癌诊断、预后判断和治疗靶点的潜能。