lncRNA GAS5在肝癌组织的表达及其与Hep3B和HepG2细胞生物学研究

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目的检测生长特异性调节转录因子5(GAS5)在肝癌组织表达,探究GAS5质粒(pc DNA-GAS5)转染对Hep3B细胞及GAS5小干扰RNA(si RNA-GAS5)转染对Hep G2肝癌细胞的侵袭增值的影响,并进一步分析其可能的调控机理。方法选取手术肝癌切除的癌组织及其癌旁组织20例,q RT-PCR检测肝癌及其癌旁组织长链非编码RNA GAS5(GAS5)表达以及Western blot检测周期依赖性蛋白激酶6(CDK6)表达。利用脂质体转染pc DNA-GAS5和si RNA-GAS5干扰Hep3B和Hep G2细胞株中GAS5表达水平,划痕实验、Transwell和CCK-8检测转染Hep3B和后Hep G2细胞的迁移、侵袭及增殖能力,流式细胞仪检测干扰后Hep G2细胞凋亡周期变化。Western blot、q RT-PCR验证细胞周期调控蛋白周期素D1(Cyclin D1)、CDK6、E2F-1表达。结果肝癌组织中GAS5表达水平低于对应癌旁组织,CDK6表达高于癌旁组织。转染pc DNA-GAS5的Hep3B细胞迁移侵袭增值能力明显减弱;转染si RNA-GAS5的Hep G2细胞迁移侵袭增值能力明显增强;转染si RNA-GAS5的Hep G2细胞Cyclin D1、CDK6、E2F-1蛋白表达下降,干扰后的Hep G2细胞周期发生G1/S期改变。结论GAS5在肝癌组织的表达出现下调;GAS5可明显抑制肝癌细胞迁移、侵袭及增殖能力;GAS5调控肝癌细胞周期变化可能是通过Cyclin D1/CDK6/E2F-1通路。
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