LncRNA ZEB1-AS1在膀胱癌中作用机制及功能研究

来源 :桂林医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:goodgay3_2004
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目的:探讨ZEB1-AS1在膀胱癌中的表达水平,并评估其在膀胱癌细胞中的功能和机制。方法:通过定量实时PCR(qRT-PCR)检测在36例膀胱癌组织(和相应的癌旁正常组织)和膀胱癌细胞系中LncRNA ZEB1-AS1的表达,并对膀胱癌细胞株进行筛选。使用筛选好的细胞株构建ZEB1-AS1稳定过表达细胞株和使用特异性si-ZEB1-AS1对细胞株进行干扰。通过CCK-8实验和克隆形成实验检测ZEB1-AS1对膀胱癌细胞增殖的影响。应用流式细胞术检测ZEB1-AS1对膀胱癌凋亡的影响,Western blot检测凋亡相关蛋白caspase 3的表达情况。应用划痕修复实验,transwell实验检测ZEB1-AS1对细胞侵袭和迁移的作用。Western blot检测ZEB1-AS1对EMT相关蛋白的表达水平的影响。应用qRT-PCR技术检测36对膀胱癌组织(和相应的正常癌旁组织)中ZEB1的表达,并通过qRT-PCR技术和Western blot技术检测对过表达和干扰ZEB1-AS1后膀胱癌细胞中ZEB1表达,分析ZEB1-AS1和ZEB1的相关性。结果:LncRNA ZEB1-AS1在膀胱癌组织中表达上调(与相应的癌旁正常组织相比),并且在膀胱癌细胞中均过表达(与正常人膀胱上皮细胞系相比)。lncRNA ZEB1-AS1过表达能显着促进肿瘤细胞增殖,抑制细胞凋亡,促进细胞迁移和侵袭,并促进EMT的形成。而下调ZEB1-AS1可明显抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,抑制细胞迁移和侵袭,抑制EMT的形成。ZBE1-AS1与ZEB1在膀胱癌组织中的表达水平呈正相关,且ZEB1-AS1过表达能促进ZEB1表达,干扰ZEB1-AS1能降低ZEB1的表达。说明在膀胱癌中ZEB1可能是是ZEB1-AS1的潜在靶点。结论:ZEB1-AS1过表达能促进膀胱癌的发生和发展,可以作为膀胱癌预后新的预测指标。
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