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背景和目的: 肝纤维化是许多慢性肝脏疾病共有的病理特征，是机体对慢性肝损伤的主动组织修复过程中，细胞外基质在肝脏内过度沉积的结果。肝纤维化的发生与肝损伤过程中引发的炎症反应密切相关，肝脏炎症时肝脏驻留巨噬细胞Kupffer细胞的激活和肝星状细胞(hepatic stellate cell，HSC)的活化、增殖是肝纤维化形成的重要细胞学基础。在这一过程中，Kupffer细胞不断被血循环中的单核细胞补充更新。最近，骨髓来源的单核/巨噬细胞(bone marrow-derived monocyte/macrophage，BMM)对肝纤维化的发展颇受关注，然而对于它们在体内的迁移机制却知之甚少。磷酸鞘胺醇(sphingosine1-phosphate,S1P)及其受体（S1PRs）作为细胞迁移的重要调节物，在许多疾病进程中发挥着重要的生物学作用。本实验室前期实验结果也表明，S1P通过S1PR3介导小鼠骨髓间充质干细胞向受损肝脏的募集。但是S1P是否介导BMM向受损肝脏的募集尚未见文献报道。15d-前列腺素J2(15-Deoxy-△12，14-Prostaglandin J2，15d-PGJ2)为过氧化物酶体增殖物活化受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ，PPARγ)的天然配体，是一种新的抗炎复合物，也有研究表明它可以影响体内外细胞的迁移。但是，15d-PGJ2在肝损伤过程中对BMM的作用尚未见报道。本研究采用胆管结扎(bile duct ligation，BDL)肝纤维化小鼠模型，以S1P、15d-PGJ2为靶分子，探讨它们在肝纤维化发生过程中对BMM向受损肝脏募集的作用，从而为肝纤维化的治疗提供新的作用靶点。 方法: 体内实验:制备骨髓细胞被增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein，EGFP)标记的嵌合体小鼠，4周骨髓重建后采用BDL造肝纤维化模型。在2周时处死小鼠，取肝组织，应用免疫荧光染色和流式细胞检测的方法鉴定并统计募集到受损肝组织中BMM的数目。同时，用real-time RT-PCR的方法检测肝组织炎症和纤维化相关蛋白的mRNA水平;用H&E、天狼猩红染色和图像分析软件检测肝组织炎症坏死面积和纤维化程度;应用羟脯氨酸检测试剂盒测定肝组织中羟脯氨酸的含量。体外实验:应用Boyden Chamber培养方法检测S1P对BMM迁移的作用。同时，采用S1PRs激动剂、拮抗剂和RNA干扰(RNAi)的方法处理细胞，鉴定参与S1P介导BMM迁移的受体类型，并应用药理学的方法对其下游的作用分子进行初步探讨。 结果: 1.BMM在BDL引起的肝损伤小鼠体内可募集至受损肝脏; 2.S1P在体外明显刺激了BMM的迁移，且呈剂量依赖性，S1PR2/3，Gi/o蛋白和PI3K参与了S1P诱导的BMM迁移; 3.与体外实验结果一致，体内实验中JTE-013（S1PR2的拮抗剂）、CAY-10444（S1PR3的拮抗剂）明显抑制了BMM向受损肝脏的募集，从而缓解了肝脏的炎症和纤维化; 4.在体内，15d-PGJ2显著减少了BDL诱导肝损伤小鼠BMM向受损肝脏的募集; 5.15d-PGJ2缓解了BDL诱导肝损伤小鼠肝脏的炎症和纤维化。 结论: 在BDL引起的肝损伤过程中大量BMM募集到受损伤的肝脏;S1PR2/3介导了S1P诱导的BMM体外迁移。JTE-013（S1PR2的拮抗剂）、CAY-10444（S1PR3的拮抗剂）和15d-PGJ2显著减少了BDL诱导肝损伤小鼠BMM向受损肝脏的募集，从而缓解了小鼠肝脏的炎症和纤维化，其中Gi/o蛋白和PI3K参与了S1P诱导的BMM迁移。提示S1P和15d-PGJ2为作用靶点将有望设计出新的抗纤维化药物。