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目的：探讨不同波长激光器用于猪脱细胞真皮基质（porcine acellular dermis matrix，PADM）打孔的可行性，确定打孔用的最佳激光器及其作用参数；制备不同规格激光微孔PADM并确定其最佳规格，以提高创面修复质量；探讨激光微孔PADM接种成纤维细胞构建活性真皮基质的可行性。方法：1．采用胰蛋白酶／Triton X-100的方法制备PADM，选择三倍频Nd∶YAG激光器、光纤激光器及CO2激光器，分别采用复制法及轮廓迂回法，对干燥及湿润的PADM进行打孔，观察各组真皮基质微孔形成情况，计算真皮基质皱缩率和热损伤率；在三倍频Nd∶YAG激光器输出功率、频率等参数固定的前提下，调整激光束扫描速度，测量微孔孔径并计算热损伤率。2．根据孔间距不同，制备4种不同规格的激光微孔PADM。将144只SD大鼠背部制作全层皮肤缺损创面，随机分为6组，每组24只：微孔组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ分别移植孔间距为0.8mm、1.0mm、1.2mm和1.5mm的激光微孔PADM+自体刃厚皮；网状组移植网状PADM+自体刃厚皮；对照组采用单纯自体刃厚皮移植。术后2、4、6周观察各组创面愈合情况，计算移植物成活率和创面收缩率，并行组织学观察。临床上采用激光微孔PADM、网状PADM与自体刃厚皮复合移植，修复瘢痕切除后继发创面9例。3．将人成纤维细胞种植于干燥组及湿润组激光微孔PADM表面，培养后第2、4、6、8、10、12天采用ELISA法测定培养液中TGF-β1和bFGF的含量。结果：1．复制法打孔的真皮基质内微孔呈圆形或椭圆形，大小不一致，轮廓迂回法的微孔均为规则圆形，大小较一致。打孔后干燥组真皮基质皱缩不明显；湿润组真皮基质发生不同程度的皱缩，复制法打孔时，光纤激光器组真皮基质的皱缩率明显高于CO2激光器组（P＜0.05），轮廓迂回法打孔时，三倍频Nd∶YAG激光器组真皮基质的皱缩率明显高于光纤激光器组和CO2激光器组（P＜0.05）。复制法打孔时，光纤激光器对湿润组真皮基质的热损伤率明显高于CO2激光器（P＜0.05），而对干燥组真皮基质的热损伤率两者差异无统计学意义（P＞0.05）。轮廓迂回法打孔时，三倍频Nd∶YAG激光器对湿润组真皮基质的热损伤率最高，光纤激光器次之，CO2激光器最低；而三倍频Nd∶YAG激光器对干燥组真皮基质的热损伤率最低，光纤激光器次之，CO2激光器最高。三倍频Nd∶YAG激光器扫描速度小于或等于80mm／s，热损伤率较低，微孔孔径变化不明显；随着扫描速度的加快，热损伤率增大，孔径随之增大；当扫描速度加快至500mm／s，孔径开始缩小，当扫描速度为600mm／s，激光束不能穿透真皮基质形成微孔。2．术后2、4周微孔组Ⅰ、Ⅱ移植物成活率低于对照组（P＜0.05），但与网状组比较差异无统计学意义（P＞0.05）；术后6周，微孔组Ⅰ、Ⅱ移植物成活率与对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05），但明显高于网状组（P＜0.05）。微孔组Ⅰ、Ⅱ术后4、6周创面收缩率明显低于对照组（P＜0.05），且术后6周明显低于网状组（P＜0.05）。组织学观察显示各复合皮组上皮化良好，胶原纤维排列整齐，基底膜结构完整。临床上9名患者中，8例激光微孔PADM移植区成活良好。3．干燥组培养液中TGF-β1和bFGF的含量在各时间点均高于湿润组（P＜0.05）。结论：1．采用三倍频Nd∶YAG激光器对干燥的PADM进行轮廓迂回法打孔，不仅效率高、热损伤小，而且微孔形状规则、大小均匀一致，孔径调节方便；80mm／s为最适宜的扫描速度。2．孔间距为0.8mm或1.0mm的激光微孔PADM与自体刃厚皮复合移植可提高创面修复质量，其中孔间距为1.0mm者是最佳规格的激光微孔PADM。3．激光微孔PADM接种成纤维细胞可构建活性真皮基质，PADM冷冻干燥后更有利于成纤维细胞的粘附与生长。