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研究目的
本研究工作以2.5%腺嘌呤混悬液灌胃与单侧输尿管结扎两种方法复制CRF大鼠模型，以金匮肾气丸“补益肾气”为治法，研究肺、肾、膀胱上APQ1-4的表达，探讨机体水液代谢的调控与机理，评价中医“肾主水”理论的科学性，为金匮肾气丸在中医慢性肾脏病的治疗与干预水液代谢调控提供实验依据。
研究方法
1金匮肾气丸治疗腺嘌呤慢性肾功能衰竭大鼠实验研究
将60只健康雄性SD大鼠，随机分正常组(n=20只)和腺嘌呤造模组(n=40只)，适应性喂养1周后，用2.5%的腺嘌呤悬浊液剂量为250mg/(kg·d)灌胃复制CRF模型4周，两组中各取10只大鼠进行血、尿肾组织病理检测，评估腺嘌呤CRF大鼠模型。剩余40只大鼠分为正常组、CRF模型组、金匮肾气丸中剂量、金匮肾气丸高剂量4组，每组10只。金匮肾气丸中、高剂量组分别给予对应浓度剂量金匮肾气丸溶液灌胃，正常组、CRF模型组大鼠予以等量蒸馏水灌胃，治疗4周，比较各组大鼠24h-UTP，血常规、血生化与肾脏病理指标。
2金匮肾气丸治疗UUO慢性肾功能衰竭大鼠实验研究
50只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组(n=10只)和UUO造模组(n=40只)。采用UUO手术法复制CRF模型，将大鼠10%水合氯醛350mg/kg腹腔注射麻醉，在左肾下极临近肾门处及输尿管的上1/3处用0#丝线结扎并剪断，缝合肌肉皮肤组织。假手术组大鼠给予等量10%水合氯醛腹腔麻醉开腹，仅钝性分离左侧输尿管并不予以结扎；正常组不做任何手术处理。UUO术后2周随机抽取10只大鼠评估UUO法CRF大鼠模型。剩余40只大鼠再分为假手术组、UUO模型组、金匮肾气丸中剂量组、金匮肾气丸高剂量组，每组10只。假手术组、UUO模型组采用蒸馏水灌胃；金匮肾气丸中、高剂量治疗组分别给予对应浓度剂量的金匮肾气溶液灌胃，疗程4周，比较各组大鼠的24h-UTP，血常规与生化、肾脏病理指标。(正常组同实验第一部分)
3.慢性肾功能衰竭大鼠水通道蛋白表达的实验研究
金匮肾气丸治疗4周，腺嘌呤灌胃与UUO法CRF各组大鼠获取肾脏、肺脏、膀胱组织，用Westernblotting检测对应的水通道蛋白AQP1、AQP2、AQP3、AQP4，将不同蛋白条带图像用ImageJ软件进行灰度值分析，对应DAPDH蛋白条带作进行数据矫正。
4.采用SPSS18.0软件对实验结果进行分析，计量资料用均数±标准差((x)±s)表示，多组间均数的比较采用两独立样本t检验和单因素方差分析，双侧检验，检验水准α=0.05，P＜0.05定义为统计差异性显著。
研究结果
1.腺嘌呤造模组4周大鼠24hU-TP、BUN、Scr与正常组比较均增高，统计有显著性差异(P＜0.05)，大鼠肾脏病理损伤与CRF病理表现一致。金匮肾气丸治疗各组与腺嘌呤模型组24hU-TP、BUN、Scr水平比较降低，有显著统计学差异(P＜0.05)，金匮肾气治疗组各组大鼠肾脏病理损伤与腺嘌呤模型组相比，有不同程度减轻。
2.UUO术后2周大鼠24hU-TP、BUN、Scr水平与正常组比较均升高，统计有显著性差异(P＜0.05)，UUO大鼠肾脏病理损伤与CRF病理表现一致。金匮肾气丸各治疗组与UUO模型组24hU-TP、BUN、Scr水平比较降低，有显著统计学差异(P＜0.05)。金匮肾气治疗组各组大鼠肾脏病理损伤与UUO模型组相比，有不同程度减轻。
3.各组大鼠肾脏、肺脏、膀胱AQP蛋白检测中
(1)腺嘌呤模型组大鼠肾脏AQP1-4与膀胱AQP3表达上调，与正常组比较有显著性差异(P＜0.05)。肺脏AQP1与膀胱AQP1表达下调，与正常组比较有显著性差异(P＜0.05)。
(2)UUO模型组大鼠肾脏AQP1与AQP4、肺脏AQP1、膀胱AQP4表达下调，与正常组比较统计有显著性差异(P＜0.05)；膀胱AQP3表达上调，与正常组比较统计有显著性差异(P＜0.05)。
(3)腺嘌呤CRF金匮肾气丸中高剂量治疗组肾脏AQP1-4均有下调，与腺嘌呤模型组比较统计有差异显著性(P＜0.05)。膀胱AQP1水平上调，与腺嘌呤模型组比较统计有差异显著性(P＜0.05)。
(4)UUO金匮肾气丸高剂量治疗组膀胱AQP4蛋白明显上调，与UUO模型组比较有显著性差异(P＜0.05)。
研究结论
1、金匮肾气丸可以改善腺嘌呤与UUO慢性肾功能衰竭大鼠的生存质量，改善肾功能，减少24h尿蛋白定量，减轻大鼠肾脏的病理损害，可不同程度改善肾脏纤维化损伤程度。
2、金匮肾气丸治疗UUO与腺嘌呤CRF大鼠，通过调节不同种类与部位AQP表达发挥作用。两者侧重有不同，金匮肾气丸治疗腺嘌呤CRF主要下调肾脏AQP1-4和上调膀胱AQP1表达。金匮肾气丸治疗UUO大鼠，其肾脏与肺脏AQP2、AQP3、AQP4表达上调不显著，而以膀胱AQP4蛋白表达上调突出。
本研究工作以2.5%腺嘌呤混悬液灌胃与单侧输尿管结扎两种方法复制CRF大鼠模型，以金匮肾气丸“补益肾气”为治法，研究肺、肾、膀胱上APQ1-4的表达，探讨机体水液代谢的调控与机理，评价中医“肾主水”理论的科学性，为金匮肾气丸在中医慢性肾脏病的治疗与干预水液代谢调控提供实验依据。
研究方法
1金匮肾气丸治疗腺嘌呤慢性肾功能衰竭大鼠实验研究
将60只健康雄性SD大鼠，随机分正常组(n=20只)和腺嘌呤造模组(n=40只)，适应性喂养1周后，用2.5%的腺嘌呤悬浊液剂量为250mg/(kg·d)灌胃复制CRF模型4周，两组中各取10只大鼠进行血、尿肾组织病理检测，评估腺嘌呤CRF大鼠模型。剩余40只大鼠分为正常组、CRF模型组、金匮肾气丸中剂量、金匮肾气丸高剂量4组，每组10只。金匮肾气丸中、高剂量组分别给予对应浓度剂量金匮肾气丸溶液灌胃，正常组、CRF模型组大鼠予以等量蒸馏水灌胃，治疗4周，比较各组大鼠24h-UTP，血常规、血生化与肾脏病理指标。
2金匮肾气丸治疗UUO慢性肾功能衰竭大鼠实验研究
50只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组(n=10只)和UUO造模组(n=40只)。采用UUO手术法复制CRF模型，将大鼠10%水合氯醛350mg/kg腹腔注射麻醉，在左肾下极临近肾门处及输尿管的上1/3处用0#丝线结扎并剪断，缝合肌肉皮肤组织。假手术组大鼠给予等量10%水合氯醛腹腔麻醉开腹，仅钝性分离左侧输尿管并不予以结扎；正常组不做任何手术处理。UUO术后2周随机抽取10只大鼠评估UUO法CRF大鼠模型。剩余40只大鼠再分为假手术组、UUO模型组、金匮肾气丸中剂量组、金匮肾气丸高剂量组，每组10只。假手术组、UUO模型组采用蒸馏水灌胃；金匮肾气丸中、高剂量治疗组分别给予对应浓度剂量的金匮肾气溶液灌胃，疗程4周，比较各组大鼠的24h-UTP，血常规与生化、肾脏病理指标。(正常组同实验第一部分)
3.慢性肾功能衰竭大鼠水通道蛋白表达的实验研究
金匮肾气丸治疗4周，腺嘌呤灌胃与UUO法CRF各组大鼠获取肾脏、肺脏、膀胱组织，用Westernblotting检测对应的水通道蛋白AQP1、AQP2、AQP3、AQP4，将不同蛋白条带图像用ImageJ软件进行灰度值分析，对应DAPDH蛋白条带作进行数据矫正。
4.采用SPSS18.0软件对实验结果进行分析，计量资料用均数±标准差((x)±s)表示，多组间均数的比较采用两独立样本t检验和单因素方差分析，双侧检验，检验水准α=0.05，P＜0.05定义为统计差异性显著。
研究结果
1.腺嘌呤造模组4周大鼠24hU-TP、BUN、Scr与正常组比较均增高，统计有显著性差异(P＜0.05)，大鼠肾脏病理损伤与CRF病理表现一致。金匮肾气丸治疗各组与腺嘌呤模型组24hU-TP、BUN、Scr水平比较降低，有显著统计学差异(P＜0.05)，金匮肾气治疗组各组大鼠肾脏病理损伤与腺嘌呤模型组相比，有不同程度减轻。
2.UUO术后2周大鼠24hU-TP、BUN、Scr水平与正常组比较均升高，统计有显著性差异(P＜0.05)，UUO大鼠肾脏病理损伤与CRF病理表现一致。金匮肾气丸各治疗组与UUO模型组24hU-TP、BUN、Scr水平比较降低，有显著统计学差异(P＜0.05)。金匮肾气治疗组各组大鼠肾脏病理损伤与UUO模型组相比，有不同程度减轻。
3.各组大鼠肾脏、肺脏、膀胱AQP蛋白检测中
(1)腺嘌呤模型组大鼠肾脏AQP1-4与膀胱AQP3表达上调，与正常组比较有显著性差异(P＜0.05)。肺脏AQP1与膀胱AQP1表达下调，与正常组比较有显著性差异(P＜0.05)。
(2)UUO模型组大鼠肾脏AQP1与AQP4、肺脏AQP1、膀胱AQP4表达下调，与正常组比较统计有显著性差异(P＜0.05)；膀胱AQP3表达上调，与正常组比较统计有显著性差异(P＜0.05)。
(3)腺嘌呤CRF金匮肾气丸中高剂量治疗组肾脏AQP1-4均有下调，与腺嘌呤模型组比较统计有差异显著性(P＜0.05)。膀胱AQP1水平上调，与腺嘌呤模型组比较统计有差异显著性(P＜0.05)。
(4)UUO金匮肾气丸高剂量治疗组膀胱AQP4蛋白明显上调，与UUO模型组比较有显著性差异(P＜0.05)。
研究结论
1、金匮肾气丸可以改善腺嘌呤与UUO慢性肾功能衰竭大鼠的生存质量，改善肾功能，减少24h尿蛋白定量，减轻大鼠肾脏的病理损害，可不同程度改善肾脏纤维化损伤程度。
2、金匮肾气丸治疗UUO与腺嘌呤CRF大鼠，通过调节不同种类与部位AQP表达发挥作用。两者侧重有不同，金匮肾气丸治疗腺嘌呤CRF主要下调肾脏AQP1-4和上调膀胱AQP1表达。金匮肾气丸治疗UUO大鼠，其肾脏与肺脏AQP2、AQP3、AQP4表达上调不显著，而以膀胱AQP4蛋白表达上调突出。