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随着社会经济的发展,人民生活环境和饮食习惯发生重大改变,癌症的发生率也大大增加。结直肠癌是我国常见的消化道恶性肿瘤,其发病率与死亡率分居恶性肿瘤第三、第四位。外科手术治疗仍是治疗结直肠癌的首选手段,同时也是根治结直肠癌的唯一手段,而术后的复发和转移仍是治疗失败的主要原因。因此,寻找一种合理有效地医疗方案迫在眉睫。CYP2S1是细胞色素P450家族重要代谢酶,隶属于CYP2家族,同时具有CYP1家族相似的功能特征。CYP2S1参与内源性物质和外来有毒、致癌化合物在生物体内的新陈代谢而维持机体的稳定。本实验利用 shRNA沉默人结肠癌HCT116细胞中CYP2S1基因,构建稳定敲减CYP2S1基因的细胞系,观察其细胞生长增殖以及β-catenin表达的状况,探讨CYP2S1影响细胞生长的作用机制。运用奥沙利铂诱导 HCT116细胞,检测奥沙利铂对 CYP2S1表达的影响及其对细胞的增殖抑制作用,探讨 CYP2S1在奥沙利铂抑制细胞增殖中的作用。本实验包括以下两个部分: 1.使用 shRNA沉默 HCT116细胞中的 CYP2S1基因,我们获得了稳定敲减CYP2S1的细胞株。与野生型细胞相比,转染组细胞显著地促进了细胞的生长增殖。进一步研究发现,转染组细胞中β-catenin表达上升,而P-β-catenin表达显著下降。推测,CYP2S1表达下调可能是通过促进Wnt信号通路中β-catenin的表达而促进细胞增殖。 2.奥沙利铂体外诱导HCT116细胞实验发现,细胞的增殖和迁移速率受到明显的抑制。随着作用时间的延长或药物浓度的增加,奥沙利铂对 HCT116的抑制作用不断增强,呈时间-浓度依赖性。进一步研究发现,随着奥沙利铂浓度的增加,细胞中CYP2S1的表达显著增强,推测奥沙利铂可以通过上调CYP2S1的表达从而抑制细胞的增殖与迁移。