电针对去卵巢大鼠膝关节软骨及软骨下骨的影响

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目的:观察电针对去卵巢诱导的膝骨关节炎大鼠关节软骨及软骨下骨的影响,并基于RANKL/RANK/OPG信号通路探讨电针对骨关节炎的作用机制。方法:90只3月龄雌性SD大鼠被随机分成假手术组(Sham组)、OVX组(去卵巢组)、治疗组(去卵巢+电针治疗组),每组30只。OVX组与治疗组实验大鼠行双侧卵巢切除术复制骨关节炎(OA)模型,假手术组只切开背部皮肤。其中电治疗组实验大鼠于术后当天开始接受电针治疗,每周5次,每天1次,每次30分钟,余2天不予以干预,总干预时间为12周;假手术组与OVX组不做干预。分别于术后4、8、12周各组随机处死10只实验大鼠,ELISA检测血清雌二醇水平、尿液I、II型胶原C肽末端(CTX-I、CTX-II);对大鼠膝关节软骨行番红O染色及Mankin评分;软骨下骨进行显微CT扫描;RT-PCR技术检测MMP-13与RANKL/RANK/OPG信号通路中RANKL、OPG的m RNA相对表达水平。结果:1.术后4、8、12周,OVX组血清雌二醇水平显著低于假手术组(P<0.05、P<0.01、P<0.01),而电针治疗组中各时间段血清雌二醇水平均高于OVX组(P<0.01、P<0.01、P<0.01)。2.术后4、8、12周,OVX组尿CTX-I水平较假手术组显著增加(P<0.01、P<0.01、P<0.01),CTX-II水平高于假手术组(P<0.05、P<0.01、P<0.01)。电针治疗组中各时间段CTX-I水平均明显低于OVX组(P<0.01、P<0.01、P<0.01);术后4周时,电针治疗组CTX-II水平与OVX组比较差异无统计学意义;而术后8、12周,CTX-II水平显著低于OVX组(P<0.01、P<0.01)。3.与假手术组相比,术后4、8、12周OVX组BV/TV显著降低(P<0.01、P<0.01、P<0.01),Tb.Th也显著降低(P<0.01、P<0.01、P<0.01);而Tb.Sp显著增加(P<0.01、P<0.01、P<0.01);术后4周两组之间Tb.N进行比较差异无统计学意义,但术后8、12周OVX组Tb.N较假手术组显著降低(P﹤0.01、P﹤0.01)。与OVX组相比,术后4、8、12周电针治疗组中BV/TV显著增加(P<0.01、P<0.01、P<0.01),Tb.Th也显著增加(P<0.01、P<0.01、P<0.01),而Tb.Sp显著减少(P<0.01、P<0.05、P<0.01);但术后4周两组Tb.N比较差异无统计学意义,而术后8、12周时,电针治疗组中Tb.N显著高于OVX组(P<0.05、P<0.01)。4.术后4、8周三组之间Mankin评分比较,差异无统计学意义;而术后12周OVX组Mankin评分较假手术组显著增高(P﹤0.01),电针治疗组的Mankin评分低于OVX组(P﹤0.01)。5.术后8、12周时,OVX组的MMP-13 m RNA表达水平明显高于假手术组(P<0.05,P<0.01),而电针治疗组MMP-13的m RNA表达水平直到术后12周时才明显低于OVX组(P<0.01);术后4、8、12周时,OVX组中的OPG表达水平显著低于假手术组(P<0.01、P<0.01、P<0.01),而RANKL的表达水平较假手术组增高(P<0.01、P<0.01、P<0.01);与OVX组比较,电针治疗组中各时间段的OPG表达水平明显增高(P<0.01、P<0.01、P<0.01),而RANKL表达水平下降(P<0.01、P<0.01、P<0.05)。结论:1、电针治疗对去卵巢大鼠膝关节软骨有保护作用;2、电针治疗保护膝关节软骨的机制可能与增加雌激素水平,影响RANKL/RANK/OPG信号通路,抑制MMP-13有关。
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