论文部分内容阅读
研究目的:了解MCI、AD、VD患者血清miRNA-107、miRNA-206及miRNA-132含量的差异;了解miRNA-107、miRNA-206及miRNA-132与患者认知功能损害严重程度的关系;探索miRNA-107、miRNA-206、miRNA-132单个指标对识别和鉴别正常老年人、MCI、AD、VD的作用,两个及两个以上miRNA水平检测的联合是否能提高上述各组患者的识别与鉴别水平。研究方法:按照年龄、性别、教育程度(年龄±10岁、性别男女比近似1:1、教育程度同为文盲或小学或初中及以上)等匹配原则进行分组,应用简易精神状态检查量表(mini-mental state examination,MMSE)、日常生活能力量表(Activities daily living,ADL)及临床痴呆评定量表(clinical dementia rating scale,CDR)对研究对象认知功能及损害程度进行评定,最终分别筛选出37例MCI组、36例AD组、30例VD患者组及37例正常对照老年人。正常对照组、MCI组均为2020年8月至2020年12月广东省广州市荔湾区芳村中南街对社区老年人群进行健康监测时采集,参照Petersen等的MCI诊断标准,结合MMSE量表评定(文盲18~21分、小学文化程度21~24分、中学文化程度及以上25~27分。)筛选出MCI患者,整群入组。AD、VD患者样本均来自2014年-2020年广州医科大学附属脑科医院老年科住院患者,AD符合《美国国立神经病语言障碍卒中研究所和阿尔茨海默病及相关疾病学会》(NINCDS-ADRDA)及《美国国立衰老研究院和阿尔茨海默病协会》(National Institute on Aging and Alzheimer’s Association,NIA-AA)AD诊断标准;VD符合《美国神经病学、语言障碍和卒中-国际神经科学学会》VD标准。AD与VD患者MMSE评分均为:文盲<17分、小学<20分、中学以上<24分,CDR≥1分,按住院时间先后入组。应用定量聚合酶链式反应(quantitative PCR,q PCR)实验方法,采用2-△△CT法计算各组人群血清中miRNA-107、miRNA-206、miRNA-132相对表达水平。采用SPSS 22.0(Statistic Package for Social Science,SPSS)软件分别进行人口学资料分析、不同亚组血清miRNA-107、miRNA-206、miRNA-132表达水平分析、差异性血清miRNA相对表达含量识别各亚组人群ROC曲线分析、不同血清miRNA水平与认知功能损害相关性分析及各亚组MMSE评分的影响因素的多元线性回归分析,采用Graphpad Prism软件进行作图比较分析。结果:1.各组血清miRNA-107、206、132相对表达含量情况正常组、MCI组、AD组、VD组血清miRNA-107相对表达含量采用中位数(25%-75%)表示分别为:0.18(0.05-0.64)、0.03(0.02-0.05)、0.85(0.61-1.25)、0.99(0.66-1.40),差异有统计学意义(F=212.43,P<0.001)。痴呆患者(AD、VD)血清miRNA-107相对表达含量均明显高于MCI组。正常组、MCI组、AD组、VD组血清miRNA-206相对表达含量采用中位数(25%-75%)表示分别为0.86(0.34-1.69)、0.06(0.04-0.10)、0.05(0.03-0.09)、0.04(0.02-0.06),差异有统计学意义(F=134.76,P<0.001);认知功能损害患者(MCI、AD、VD)血清miRNA-206相对表达含量明显下降。正常组、MCI组、AD组、VD组血清miRNA-132相对表达含量采用中位数(25%-75%)表示分别为0.60(0.08-0.96)、0.15(0.10-0.25)、0.16(0.10-0.24)、0.07(0.05-0.11),差异有统计学意义(F=91.17,P<0.001),MCI、AD、VD组下降显著,VD组更明显。2.血清miRNA-107、miRNA-206、miRNA-132与认知功能减退曲线下面积血清miRNA-206、miRNA-132相对表达含量鉴别正常与认知功能减退(包括MCI组、AD组、VD组)的曲线下面积(AUC)分为别为0.845、0.732,P<0.001,95%可信区间(CI)分别为0.790-0.901、0.659-0.805。进一步据ROC曲线可知,血清miRNA-206与miRNA-132相对表达量联合鉴别诊断正常组与认知功能减退三组的曲线下面积为0.897,P<0.001,95%可信区间为0.858-0.936。血清miRNA-107相对表达量鉴别轻度认知功能损害(MCI)与痴呆(AD、VD)的AUC为0.987,P<0.001,95%CI为0.977-0.997。血清miRNA-132相对表达量鉴别AD与VD的AUC为0.787,P<0.001,95%CI为0.723-0.851。3.各组血清miRNA-107、miRNA-206、miRNA-132相对表达含量与认知功能关系采用Pearson相关分析血清miRNA-107、miRNA-206、miRNA-132相对表达含量与MMSE、ADL、CDR量表评分结果显示,血清miRNA-107与MMSE评分呈负相关(r=-0.741,p<0.05),血清miRNA-206、miRNA-132与MMSE评分呈正相关(r=0.485、0.354,p<0.05)。血清miRNA-107与ADL评分呈负相关(r=-0.675,p<0.05),血清miRNA-206、miRNA-132与ADL评分无明显相关性(r=0.094、0.063,p>0.05)。血清miRNA-107、miRNA-206、miRNA-132与CDR均无明显相关性(r=0.167、0.224、0.220,p>0.05)。进一步使用多元线性回归模型对各亚组基线水平血清中miRNA-107、miRNA-206、miRNA-132相对表达含量与MMSE评分的影响进行相关性检验,结果显示只有血清miRNA-206相对表达含量与MCI组MMSE评分存在显著线性关系(B=15.079,P<0.05),提示miRNA-206相对表达含量升高一个单位,则MMSE评分平均提高约15分。结论:1.AD和VD患者血清miRNA-107相对表达水平明显高于正常对照及MCI组;应用miRNA-107相对表达含量识别MCI与痴呆(AD、VD)可能有一定助益。2.MCI、AD、VD血清miRNA-206、miRNA-132相对正常老人表达水平均明显下降;miRNA-206对识别正常老人和认知功能损害患者可能有一定价值;miRNA-206对评估MCI患者认知功能损害程度可能有更多价值。3.AD患者血清miRNA-132相对表达含量明显高于VD组;血清miRNA-132在识别认知功能受损及鉴别痴呆类型中可能有一定作用。4.血清miRNA-206联合血清miRNA-132检测可能有助于提高认知功能损害(MCI、AD、VD)的识别水平。