【摘 要】
：
研究目的:取退变髓核组织和非退变髓核组织进行SA-β-Gal染色,观察其染色情况。通过分离大鼠髓核细胞,体外进行原代髓核细胞的培养并利用不同浓度的胎牛血清诱导髓核细胞衰老,探讨营养缺乏与髓核细胞衰老之间的关系;并且通过检测HIF-1α的表达含量明确髓核细胞衰老和HIF-1α之间的关系。研究方法:取人体退变髓核组织和非退变髓核组织进行SA-β-Gal染色。取200-250g的雄性大鼠的髓核组织,分离
论文部分内容阅读
研究目的:取退变髓核组织和非退变髓核组织进行SA-β-Gal染色,观察其染色情况。通过分离大鼠髓核细胞,体外进行原代髓核细胞的培养并利用不同浓度的胎牛血清诱导髓核细胞衰老,探讨营养缺乏与髓核细胞衰老之间的关系;并且通过检测HIF-1α的表达含量明确髓核细胞衰老和HIF-1α之间的关系。研究方法:取人体退变髓核组织和非退变髓核组织进行SA-β-Gal染色。取200-250g的雄性大鼠的髓核组织,分离髓核细胞,体外进行原代髓核细胞的培养,将髓核细胞随机进行实验分组,用不同浓度的胎牛血清培养72小时,其中对照组为10%浓度的胎牛血清,低浓度组为5%胎牛血清,无浓度组为1%胎牛血清。使用SA-β-Gal染色剂进行细胞染色,观察正常髓核细胞和衰老髓核细胞的细胞形态学变化,在光学显微镜下计数总细胞数及SA-β-Gal阳性细胞数。利用western blot检测三组间p53、p21、HIF-1α蛋白的表达含量,定性分析三组间蛋白表达不同。利用qPCR技术检测三组间p53、p21、HIF-1αmRNA的表达含量,定量分析三组间mRNA表达不同。结果:通过取人体非退变髓核组织和退变髓核组织进行SA-β-Gal染色情况发现虽然二者的髓核细胞都会被蓝染,但是他们之间有明显不同。非退变髓核组织内髓核细胞染色较浅,但是其细胞形态略微呈圆形,并不十分规整,轮廓较为清晰。而退变髓核组织内髓核细胞被明显蓝染,其细胞形态也发生了变化,细胞形态较为规整,呈圆形,轮廓清晰。对照组、低浓度组、无浓度组SA-β-Gal染色发现三组都有蓝染细胞,但三组蓝染细胞数有明显不同,并且具有明显统计学意义（F=30.023,P<0.01）。多重比较结果显示:对照组和低浓度组对比无统计学意义（P>0.05）,而低浓度组和无浓度组对比有明显统计学意义（P<0.01）,对照组和无浓度组对比有明显统计学意义（P<0.01）。Western blot技术定性分析显示:对照组、低浓度组、无浓度组髓核细胞都表达p21、p53、HIF-1α蛋白,但三组的表达含量有较为明显的差异。qPCR技术定量分析显示三组髓核细胞都表达p21、p53、HIF-1α,但三组间的表达含量有明显差异。多重比较结果显示:p21在对照组和低浓度组的表达有统计学意义（P<0.05）,p21在对照组和无浓度组对比有明显统计学意义（P<0.01）,p21在低浓度组和无浓度组对比有统计学意义（P<0.05）;p53在对照组和低浓度组的表达有明显统计学意义（P<0.01）,p53在对照组和无浓度组对比有明显统计学意义（P<0.01）,p53在低浓度组和无浓度组间对比无明显统计学意义（P>0.05）;HIF-1α在对照组和低浓度组有统计学意义（P<0.05）,HIF-1α在对照组和无浓度组有明显统计学意义（P<0.01）,HIF-1α在低浓度组和无浓度组无统计学意义（P>0.05）。结论:低营养能诱导髓核细胞衰老,营养缺乏是髓核细胞衰老的因素之一;正常髓核细胞和衰老髓核细胞都有衰老基因表达（p53、p21）,但衰老髓核细胞表达高于正常髓核细胞;HIF-1α在正常髓核细胞和衰老髓核细胞都有表达,但衰老髓核细胞表达明显低于正常髓核细胞;SA-β-Gal在非退变髓核组织和退变髓核组织内都会有表达,但退变组织内颜色更深。
其他文献
目的:G蛋白偶联受体激酶5（G-protein coupled receptor kinase 5,GRK5）的rs10886471多态性位点与中国汉族人群的2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）患病风险有关。目前GRK5 rs10886471位点多态性与非酒精性脂肪性肝病（Nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD）和冠状动脉粥
大麻素的生物学效应主要由G蛋白偶联受体家族的两个成员:大麻素I型受体（Cannabinoid type 1 receptor,CB1R）和大麻素II型受体（Cannabinoid type 2 receptor,CB2R）介导。CB1R在中枢神经系统（Central nervous system,CNS）中高度表达,参与各种脑功能调节,包括执行力、情感、奖励和记忆处理等。与CB1R不同,CB2R被
目的:随着我国人口老龄化情况的不断加剧,主动脉瓣病变人数也在不断增加。尤其是以瓣膜纤维增生和瓣膜纤维粘液变为代表的主动脉瓣退行性病变发生率不断增高。而且风湿性瓣膜病变在主动脉瓣病变患者中所占比例也较高。目前尚未出现治疗主动脉瓣病变的特效药物,主动脉瓣置换手术仍是治疗主动脉瓣病变的有效手段。以前,常规的外科主动脉瓣置换术（Surgical Aortic Valve Replacement,SAVR）
目的:探究脑瘫合并癫痫患儿脑瘫和癫痫的发作类型、头部影像学及脑电图相关资料的差异,阐明其脑瘫合并癫痫的临床特征;探究运动疗法、低频重复经颅磁刺激疗法对脑瘫合并癫痫患儿康复的影响,阐明其应用价值,以期为临床上脑瘫合并癫痫患者康复治疗方案提供理论指导。方法:回顾性分析2019年01月至2020年10月期间收治的脑瘫合并癫痫患儿96例和脑瘫不伴癫痫患儿65例的临床资料,分析两组患者包括脑瘫和癫痫发作类型
帕金森病（Parkinson’s disease,PD）是一种常见于老年人的神经系统退行性疾病,其主要病理特征是中脑黑质（substantia nigra,SN）多巴胺（dopamine,DA）能神经元的进行性缺失。PD的患病率随着年龄的增长而增加,主要临床特征为静止性震颤、肌僵直、运动迟缓、姿势步态障碍等运动症状。PD的非运动症状出现在运动症状之前,包括抑郁、焦虑、嗅觉功能障碍、睡眠障碍,以及胃
第一部分目的:观察不同减重方式对肥胖PCOS患者生殖内分泌及糖、脂代谢的影响。方法:选取2017年9月至2018年12月就诊于青岛市妇女儿童医院生殖中心因排卵障碍性不孕准备接受辅助生殖技术的肥胖PCOS患者（BMI≥25）118例,随机分为实验组和对照组（各59例）,对照组采用饮食及运动减重方式,实验组采用饮食联合二甲双胍及达英-35治疗,六个月后对比两组患者相关指标。结果:实验组和对照组减重前后
一、富血小板血浆促进骨折愈合的效果评价目的:明确富血小板血浆（platelet-rich plasma,PRP）局部注射促进骨折愈合的作用效果,为应用其治疗骨折不愈合的实用性提供保证。方法:回顾性分析我院2015年1月～2016年12月收治的四肢长骨干骨折术后3个月愈合缓慢（骨痂和骨折线影像学评分≤3分）患者61例,男26例,女35例,年龄27～61岁,平均（51.5±7.1）岁。根据是否局部注射
目的:本研究旨在探讨血清生物标志物超敏C反应蛋白/清蛋白比值（Hypersensitive CRP-Albumin ratio,CAR）以及胱抑素C（Cystatin C,CysC）在冠状动脉慢血流（Coronary slow flow,CSF）现象中的病理生理机制及对CSF的预测价值。方法:本研究选取了2018年6月-2019年12月因“胸痛、胸闷”等收住入青岛大学附属医院心血管内科住院接受选择
目的:探究脑蛋白水解物-Ⅰ（Cerebroprotein Hydrolysate-I,CH-I）改善血管性痴呆（vascular dementia,Va D）小鼠认知和保护海马神经元的作用机制。方法:SPF级雄性昆明小鼠70只,通过Y迷宫淘汰学习能力特别差的小鼠,剩余60只,随机选择10只作为假手术组（Sham）,其余50只采用双侧颈总动脉阻断结合尾部放血法建立Va D小鼠模型,Sham组仅分离双
目的:通过研究二氢青蒿素（Dihydroartemisinin,DHA）对人T细胞淋巴瘤细胞（Jurkat、HuT 78）PTEN基因表达和AKT蛋白磷酸化的影响,探讨二氢青蒿素抗T细胞淋巴瘤的作用。方法:按照常规细胞培养方法培养人T细胞淋巴瘤细胞Jurkat细胞和HuT 78细胞,在细胞处于对数生长期时,选取生长状态良好且无污染的细胞进行后续实验。使用二氢青蒿素分别干预Jurkat细胞和HuT