【摘 要】
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第一部分门静脉结扎术促进梗阻性黄疽大鼠肝脏再生目的:建立大鼠梗阻性黄疸模型,探讨门静脉结扎术对梗阻性黄疸大鼠非结扎侧肝脏再生的影响。方法:雄性SD大鼠90只,随机分为三组:假手术对照组（C-Sham组）、梗阻性黄疸对照组（C-OJ组）和门静脉结扎组（PVL组）。C-Sham组仅游离大鼠肝左、中叶的胆管和门静脉,不做结扎和切断;C-OJ组通过结扎并切断大鼠肝左叶和中叶的胆管,建立梗阻性黄疽模型;PV
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第一部分门静脉结扎术促进梗阻性黄疽大鼠肝脏再生目的:建立大鼠梗阻性黄疸模型,探讨门静脉结扎术对梗阻性黄疸大鼠非结扎侧肝脏再生的影响。方法:雄性SD大鼠90只,随机分为三组:假手术对照组（C-Sham组）、梗阻性黄疸对照组（C-OJ组）和门静脉结扎组（PVL组）。C-Sham组仅游离大鼠肝左、中叶的胆管和门静脉,不做结扎和切断;C-OJ组通过结扎并切断大鼠肝左叶和中叶的胆管,建立梗阻性黄疽模型;PVL组在C-OJ组模型基础上,在相应梗阻性黄疽时间点前24h行大鼠肝左、中叶门静脉的结扎,达到相应梗阻性黄疸时间点后各组取标本,检测未结扎侧肝脏占全肝重量的比率、免疫组织化学方法和免疫荧光方法检测未结扎侧肝细胞中增殖细胞核抗原（KI-67）的表达、血清总胆红素（TBil）、直接胆红素（DBil）、白蛋白含量（ALB）、丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）含量;达到相应的实验时间点获取大鼠的结扎侧和非结扎侧肝脏做H-E染色,观察肝脏细胞形态的变化。结果:PVL组未结扎侧肝脏占全肝重量比率和未结扎侧肝脏KI-67表达量在各时间点均明显高于C-OJ组和C-Sham组（P<0.05）;C-OJ组未结扎侧肝脏占全肝重量比率和未结扎侧肝脏KI-67表达量在48h、72h、120h、168h时间点明显高于C-Sham组（P<0.05）。C-OJ组、PVL组的TBIL和DBIL含量在各时间点均高于C-Sham组（4.34±1.56）umol/L、（2.85±1.40）umol/L（P<0.05）。在48h时间点,PVL组的ALB含量为（23.75±3.16）8/L,低于C-Sham组的（31.25±2.03）8/L和C-OJ组的（30.32±3.35）g/L（P<0.05）。PVL组、C-OJ组的ALT和AST含量均在36h时间点达到高峰,PVL组ALT和AST含量分别为（356.53±74.36）U/L、（843.76±156.43）U/L,C-OJ组ALT和AST含量分别为（146.62±50.24）U/L、（501.87±142.54）U/L,组间差异有统计学意义（P<0.05）;PVL组ALT含量在48h、120h、168h与C-OJ组无明显差异（P>0.05）,PVL组AST含量在 120h、168h与C-OJ组无明显差异（P>0.05）。PVL组结扎侧肝脏HE染色可见肝细胞明显萎缩,局部可见变性坏死,非结扎侧肝细胞体积增大、核深染、核分裂明显增多。结论:结扎大鼠70%肝脏的胆管可以稳定地建立梗阻性黄疸模型;门静脉结扎术可以安全、有效地促进梗阻性黄疸大鼠未结扎侧肝脏再生第二部分门静脉结扎术促进梗阻黄疽大鼠肝再生信号转导通路的初步研究目的:研究门静脉结扎术促进梗阻黄疸大鼠肝再生的信号转导通路方法:在第一部分三个实验组（C-Sham组、C-OJ组和PVL组）相应时间点取大鼠血清、结扎侧肝脏和非结扎侧肝脏,酶联免疫吸附测定法检测相应实验时间点的血清TNF-α、IL-6表达水平;western-blot检测各时间点相应的肝脏内HIF-1α、NF-K B P65和P50蛋白表达水平;应用免疫组织化学方法检测48h实验时间点未结扎侧肝细胞核内NF-K B P50的表达水平。结果:术后C-OJ组和PVL组TNF-α、IL-6表达量均迅速增加,在术后48h达到高峰。C-OJ组TNF-α表达量除168h时间点外均高于对照组;PVL组TNF-α表达量在各个时间点均高于C-sham组和C-OJ组。C-OJ、PVL组IL-6在各实验时间点的表达量均高于对照组;在各个实验时间点,PVL组的IL-6的表达量均高于C-sham组和C-OJ组。在C-Sham组和C-OJ组各时间点,肝细胞内HIF-1α未见明显表达;PVL组结扎侧肝细胞内HIF-1α表达明显升高,非结扎侧肝细胞内HIF-1α未见明显表达。C-OJ组、PVL组的结扎侧和非结扎侧肝细胞中N F-κ B P65和P50表达量均明显升高;48h时间点PVL组未结扎侧肝细胞核内NF-K B P50表达水平明显高于C-sham组。结论:门静脉结扎术可能通过HIF-1α诱导TNF-α高表达启动未结扎侧肝再生,然后通过N F-κ B和IL-6等共同参与的信号转导通路促进未结扎侧肝再生。
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