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我国是世界海水养殖产业大国,随着养殖品种的增多和养殖规模的扩大,病害已经成为水产养殖可持续发展的主要障碍。虹彩病毒肿大细胞病毒是水产养殖鱼类重要的病毒性病原。目前,对于鱼类虹彩病毒的侵入机制仍诠释不清,至今尚未鉴定出虹彩病毒的受体,亦未开发出有特效的药物和实用的疫苗。
本文研究了虹彩病毒科蛙病毒属的虎纹蛙病毒(TFV)和传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)侵入宿主细胞的分子机制和窖蛋白-1在虹彩病毒侵入过程中的作用。首先,通过病毒感染动力学和侵入动力学阐述了虹彩病毒.ISKNV、TFV侵入宿主细胞是一个相对缓慢的过程,推测是一种胞膜窖依赖的内吞作用方式。进一步,通过网格蛋白依赖内吞途径相关的各种化合物处理细胞,阐明了虹彩病毒ISKNV、TFV侵入宿主细胞是一种网格蛋白非依赖的内吞机制,不同的是ISKNV侵入细胞后不经历酸性细胞器,而TFV则是pH依赖在侵入细胞后需要经历酸性细胞器过程。进而,我们利用胞膜窖依赖内吞途径相关的各种化合物处理细胞,结果显示虹彩病毒ISKNV、TFV侵入宿主细胞是一种依赖于胆固醇、窖蛋白-1.动力蛋白、信号转导和细胞骨架网络的胞膜窖介导的内吞作用方式。该结果与经典的虹彩病毒模型,即蛙病毒FV3侵入BHK-21细胞的网格蛋白依赖的内吞过程有着明显的不同。此外,我们分析窖蛋白-1在虹彩病毒侵入过程中的作用,通过蔗糖密度梯度共分离及相关分子生物学实验,证实窖蛋白-1在侵染过程中与病毒蛋白之间存在着共定位的关系,并且鉴定出于窖蛋白-1相互作用的虹彩病毒结构蛋白为主衣壳蛋白。通过本文的研究阐述了虹彩病毒感染细胞的早期机制、理化性质,对了解病毒整个侵染机制、病毒受体研究等奠定实验基础,发展了鱼类病毒与宿主互作学科领域,为有效控制鱼类虹彩病毒提供理论基础和有效靶位。