七鳃鳗L-C3-like基因克隆、蛋白表达及相关免疫学研究

被引量 : 0次 | 上传用户:charse
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
补体第三组分(The third complement component, C3)是血清中含量最为丰富的补体蛋白,功能上处于经典途径、甘露糖凝集素途径和旁路途径三条激活途径的启动汇合位置,被视为补体系统的核心分子,是连接天然免疫和适应性免疫的桥梁,在免疫防御、调控、病理中均发挥重要作用。在抗原抗体复合物或病原体的刺激下,通过级联反应,活化补体C3,随后在靶细胞表面形成膜攻击复合体,最终达到裂解靶细胞的目的。另外,补体C3分子及其裂解产物还有一系列调节免疫系统的功能。总体来说,补体C3分子在先天性免疫和适应性免疫系统中,都起着重要的作用。七鳃鳗作为稀有的无颌类脊椎动物的代表,进化地位处于无脊椎动物与脊椎动物之间,其独特的进化地位及可变淋巴受体VLR介导的特殊的适应性免疫系统受到免疫学家的关注。曾有报道称七鳃鳗补体C3分子由三条链β、α、γ组成,但是,其一致性与哺乳类动物补体C3分子相比不到40%,关于七鳃鳗体内的补体C3相关的免疫学功能,也尚不明确,且七鳃鳗体内是否存在其他补体分子也是未知,由此,对于七鳃鳗是否存在真正意义的补体系统有诸多疑点。为了研究所谓的七鳃鳗体内的补体C3分子是否等同于传统哺乳动物意义上的C3分子及其相关的免疫学功能特点,我们进行了类日本七鳃鳗(Lampetra japonica)补体C3(L-C3-like)分子开放阅读框全长及3’非编码区的基因cDNA克隆,获得全序列6274bp,其中开放阅读框全长5013bp,编码1671个氨基酸,针对前人命名的α链与γ链的连接区域设计引物扩增获得L-C3-like-2、经原核表达及蛋白纯化,纯化后的重组蛋白经质谱鉴定表达无误,进一步进行抗七鳃鳗补体L-C3-like-2的兔多克隆抗体的制备,利用自行制备的多克隆抗体对天然L-C3-like分子进行相关的免疫学研究,激光共聚焦实验对七鳃鳗L-C3-like分子进行亚细胞定位,流式细胞术方法检测到L-C3-like分子在免疫小体细胞中有表达,Real-time PCR和Western blot分别在转录水平和蛋白水平显示各组织的蛋白表达情况。免疫共沉淀证实L-C3-like分子与VLRB存在相互作用关系,血清学检测及靶细胞沉积实验印证L-C3-like功能。本论文通过对七鳃鳗抗补体L-C3-like-2多克隆抗体的成功制备为相关免疫学功能的研究奠定基础,重新揭开最低等脊椎动物先天性及适应性免疫系统的研究篇章,为解决其起源与进化的谜团提供重要线索。
其他文献
学生是学习活动的主人,在教学中通过一系列的自主学习活动。激发学生的内需,促进自主学习,使学生真正成为学习的主人。
中山大学信息管理系“图书馆学研究”课程任课教师本着“只有创新的教学才能培养创新人才”的改革理念 ,在“图书馆学研究”课程的教学中进行了一系列教学改革 ,其中包括 :邀
为实现复杂机械产品虚拟样机的复用,提出了一种由程序驱动参数化虚拟样机尺寸参数来自动重建虚拟样机的方法。论述了符合参数化设计需要的复杂机械产品虚拟样机基础模型建模
随着我国经济体制改革的不断深入,劳动用工方式呈现出多样化的特点,由此引发劳动用工管理面临许多新的问题和矛盾。尤其是进入21世纪,在经济环境日趋复杂、劳动法律法规不断完善
财务舞弊是近年来我国上市公司容易发生的问题之一,小到影响投资人,大到影响国民经济的发展,因此应该给予防范与监管。要想建立起有效的防范体系,就必须搞清楚上市公司进行公
本文首先构建了具备微观基础的经济模型,对我国对外贸易产业结构调整进行了相应的理论分析,得出了在经济均衡状态应该具备的动态方程,据此采用VAR实证模型实证检测了我国对外
目的 观察仙鹤草乙醇提取物的抗炎镇痛作用。方法 采用二甲苯致炎法、酒石酸锑钾扭体法和热板法观察仙鹤草乙醇提取物连续给药 (相当于生药 8 0、16 0 g/kg ,ig ,qd× 5 )
<正> 仙人掌系仙人掌科植物仙人掌的根及茎。功能清热解毒、活血消肿。近年来,笔者临床应用仙人掌(鲜品去刺,下同)治疗急性咽炎、急性气管炎、慢性气管炎合并感染、支气管扩
与其他来源的溶菌酶相比 ,人溶菌酶具有独特的优越性和多种多样的药理作用效果 ,在临床上具有多种重要应用价值。但天然人溶菌酶来源极其困难 ,利用重组DNA技术进行生产是解