【摘 要】
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该实验室以大肠杆菌(Escherichia.coli)和鼠伤门氏杆菌(Salmonella.typhimurium)的aroA基因为模板,通过基因优化技术获得了四个高草甘膦抗性的重组或突变EPSP合成酶,其中两个
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该实验室以大肠杆菌(Escherichia.coli)和鼠伤门氏杆菌(Salmonella.typhimurium)的aroA基因为模板,通过基因优化技术获得了四个高草甘膦抗性的重组或突变EPSP合成酶,其中两个突变酶都发生了T42M突变.在此基础上,该论文通过定点突变方法对大肠杆菌野生型aroA基因及以基因优化技术获得的aroAM1基因作进一步改造,使其编码的EPSP合成酶的第42位氨基酸残基由苏氨酸置换为甲硫氨酸.对获得的两个T42M突变型EPSP合成酶的酶动力学性质研究表明,与相应对照相比,T42M突变酶的酶活力提高0.1~3.7倍,Km[PEP]值降低7.0~8.5倍,Ki[glyphosate]值增大了0.06~30.7倍,从而使草甘膦抗性得到不同程度的提高.T42M突变型EPSP合成酶的研究将为探索酶结构和功能的关系以及草甘膦与酶作用的模式提供理论依据.
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