补肾活血法及其组方对PCO大鼠卵巢局部相关基因表达影响的研究

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目的:在预实验基础上建立了较为合理的多囊卵巢实验动物模型;采用中药汤剂补肾化瘀方干预实验动物模型的方法,研究补肾化瘀方对实验大鼠卵巢局部颗粒细胞和卵泡膜细胞相关基因表达的影响;探讨肾虚血瘀与多囊卵巢综合征之间理论上的内在关系;为实验及临床研究PCOS提供思路。方法:选用6周龄SPF级SD雌性大鼠79只,有规律动情周期,将其饲养于SPF级动物所要求的环境中,按1:5的比例,将实验动物随机分为造模组和正常组后,用来曲唑灌胃诱导大鼠PCO病理模型,正常组同期用1%羧甲基纤维素水溶液灌胃21天。造模成功后,造模组随机分为模型空白对照组、补肾化瘀方高剂量组、补肾化瘀方中剂量组、补肾化瘀方低剂量组及阳性药物对照组,加上正常组,共六组,分别用生理盐水、补肾化瘀方不同浓度的汤剂和达英-35进行药物干预,(Qd×3d,休息1d)×21次。干预周期结束后每组随机抽取八只大鼠的一侧卵巢分离颗粒细胞,实时荧光定量PCR测定基因表达数值以观察补肾化瘀方对PCO大鼠卵巢颗粒细胞和卵泡膜细胞上CYP17、AR、IGFR、ER、INSR、LHR、FSHR、TGFR、MMP2、MMP9、follistain、tPA、EGFR等13个相关基因表达的影响。结果:①正常组与模型空白对照组比较,被检测13个基因中有AR、ER、LHR、FSHR、MMP9、EGFR、IGFR、INSR、tPA、TGFR共10个基因,差异有统计学意义(P<0.05)。②在卵巢颗粒细胞CYP17表达上,补肾化瘀方低剂量组与补肾化瘀方中剂量组差异有显著统计学意义(P<0.01)。③13个被检测基因中,卵巢颗粒细胞上有CYP17、AR、IGFR、ER、INSR、LHR、FSHR、TGFR、MMP9、tPA、EGFR共11个基因各组间表达差异有统计学意义(P<0.05)。而仅基因AR、EGFR共2个基因在卵巢卵泡膜细胞上各组间表达差异有统计学意义(P<0.05)。④补肾化瘀方低剂量组、阳性药物对照组、正常组与模型空白对照组比较,在卵巢颗粒细胞AR表达上差异有统计学意义(P<0.05);补肾化瘀方中剂量组、补肾化瘀方低剂量组与模型空白对照组比较,在卵巢颗粒细胞IGFR表达上差异有统计学意义(P<0.05);补肾化瘀方低剂量组、正常组与模型空白对照组比较,在卵巢颗粒细胞FSHR表达上差异有统计学意义(P<0.05)。结论:补肾化瘀方对PCO大鼠颗粒细胞和卵泡膜细胞上相关基因的表达有影响,提示补肾化瘀方治疗PCOS可能与改善卵巢局部颗粒细胞上和卵泡膜细胞基因受体表达有关。
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