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我国是烟草产销大国,为了防治烟叶的真菌病害,提高烟叶的产量和质量,在烟草种植过程中三唑类杀菌剂农药的使用不可避免。在三唑类杀菌剂使用过程中,由于种植者操作的不规范和喷施过量,可能出现烟叶中三唑类农残留超标的现象。烟叶中残留的三唑类杀菌剂污染环境、危害人体健康、影响我国进出口贸易,因此,烟叶中三唑类杀菌剂的快速、高效的痕量分析尤为重要。本文旨在研究针对烟叶中三唑醇的快速、可视化检测方法,通过分子印迹固相萃取(Molecularly Imprinted Solid Phase Extraction,MISPE)法对复杂基质中的三唑醇进行分离、富集,结合纳米金(gold nanoparticles,AuNPs)比色传感器和AuNPs比色凝胶对前处理后的样品进行半定量或定量分析。主要研究内容如下:1.三唑醇-分子印迹聚合物(Molecularly Imprinted Polymers,MIPs)的制备及其吸附性能的研究。基于Gaussian09平台及密度泛函理论(Density Functional Theory,DFT)模拟模板分子三唑醇分别与功能单体MAA、TFMAA、AA可作用形成的复合物的结构模型及结合能量,最终确定模板分子三唑醇与最优功能单体MAA的配比为1:3。在此基础上,通过沉淀聚合法制备了平均粒径为236nm的三唑醇-MIPs,实验选择吸附时间为60min,确定MIPs的动力学吸附规律符合准二级吸附模型,等温吸附规律符合Freundlich吸附,属于表面非均匀的多分子层吸附;MIPs对三唑醇特异性识别能力良好。2.建立针对三唑醇的快速、可视化AuNPs比色检测方法。通过优化,本AuNPs比色传感器相较于其他三唑醇AuNPs比色传感器,响应更加灵敏,检测时间更短,可检测更低浓度的三唑醇,6min内实现三唑醇浓度范围为0.15-32μmol/L的快速、可视化半定量分析或紫外-可见光分光光度计下的定量分析。AuNPs比色凝胶对三唑醇响应时间为10min,该比色凝胶20天内性能稳定,不发生颜色和紫外-可见光吸收光谱的改变,且可同时实现三唑醇浓度为30-180μmol/L的快速、可视化半定量分析和定量分析,本研究的AuNPs解决了AuNPs比色传感器颜色及光谱随检测时间增长而迅速变化导致的检测误差问题;本比色凝胶为固体状态,方便携带,为检测过程提供方便。3.经MISPE前处理加标烟叶样品,利用AuNPs比色传感器、AuNPs比色凝胶检测烟叶中的三唑醇,并与UHPLC-MS/MS方法比对。三种检测方法的回收率范围分别为93.574-112.126%、101.011-104.471%、90.275-104.9%,RDS小于8.430%、6.23%、3.521%,满足烟叶中三唑类杀菌剂分析要求。相较于AuNPs比色传感器,AuNPs比色凝胶可提高检测结果的准确性、稳定性和重现性。