汉黄芩素对骨肉瘤Mg-63细胞的抑制作用及相关机制研究

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目的:本研究主要探讨汉黄芩素(Wogonin)对MG-63细胞增殖、凋亡的影响及汉黄芩素干预下MG-63细胞AMPK、S6K、4EBP1磷酸化水平的改变。  方法:选择处于对数生长期的骨肉瘤细胞MG-63,CCK-8法检测汉黄芩素对细胞增殖的影响。将不同浓度汉黄芩素处理后的MG-63细胞DAPI染色在荧光显微镜下观察细胞凋亡情况。分别用不同浓度的汉黄芩素处理呈对数生长的MG-63细胞,Western Blotting检测细胞凋亡蛋白PARP表达水平。选择不同浓度的汉黄芩素作用于呈对数生长的MG-63细胞,处理30min,Western Blot检测AMPK、S6K、4EBP1磷酸化水平的变化;选择处于对数生长期的MG-63细胞,分别加入5ml含汉黄芩素的培养基(浓度100uM),处理不同的时间,Western Blot检测AMPK、S6K、4EBP1蛋白磷酸化水平的变化,并明确汉黄芩素对骨肉瘤MG-63细胞AMPK、S6K、4EBP1磷酸化的影响。  结果:在体外,一定浓度的汉黄芩素对MG-63细胞有增殖抑制作用。随着汉黄芩素作用浓度的升高,细胞凋亡率随之升高。一定浓度的的汉黄芩素可以促进MG-63细胞PARP表达。与对照组相比,汉黄芩素处理组MG-63细胞的AMPK磷酸化水平显著增高,4EBP1、S6K磷酸化水平降低。  结论:汉黄芩素可以抑制MG-63细胞增殖,促进其凋亡。其作用机制可能与影响AMPK/mTOR信号通路的活性有关。
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