外周血SBEM、hMAM表达与乳腺癌微转移关系的研究

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目的:研究乳腺癌患者外周血中人乳珠蛋白( human moglobin , hMAM-mRNA)、乳腺上皮小粘蛋白(small breast epithelial mucin,SBEM-mRNA)的表达情况,探讨hMAM-mRNA、SBEM-mRNA与乳腺癌微转移的关系。研究对象:乳腺癌患者外周血中hMAM-mRNA、SBEM-mRNA。方法:通过逐步稀释MCF-7乳腺癌细胞总RNA浓度,使RNA浓度呈10倍梯减后进行逆转录,再将逆转录产物进行PCR和巢式PCR以对比RT- PCR、Nested-RT- PCR实验方法的灵敏度;MCF-7乳腺癌细胞SBEM-mRNA、hMAM-mRNA表达为阳性对照,检测20例乳腺良性肿瘤患者、10例其他系统恶性肿瘤患者、10例正常人群外周血hMAM-mRNA、SBEM-mRNA表达情况,研究这两种标记物表达的特异性;检测92例乳腺癌术后患者外周血中hMAM-mRNA、SBEM-mRNA表达情况,比较这两种指标的阳性率以及它们各自与临床病理参数之间的关系。结果:Nested-RT-PCR技术在hMAM-mRNA、SBEM-mRNA的检测中,可以以0.005ngRNA为反应模板扩增出目的片段,灵敏度较RT-PCR更高;hMAM-mRNA在乳腺良性肿瘤患者、其他系统恶性肿瘤患者、健康志愿者外周血中均为阴性;92例乳腺癌患者外周血中hMAM-mRNA表达率为43.5%(40/92 ),hMAM-mRNA在外周血中的表达与ER,PR状态、患者月经状况、肿瘤大小无关。与Her-2、CEA、CA15-3在外周血中是否阳性表达及患者年龄相关。与腋窝淋巴结转移状况密切相关。SBEM–mRNA在乳腺良性肿瘤患者、其他系统恶性肿瘤患者、健康志愿者外周血中均为阴性;92例乳腺癌患者外周血中SBEM -mRNA表达率为46.7%(43/92 ),SBEM–mRNA在外周血中的表达与ER,PR状态、患者月经状况、肿瘤大小无关。与CEA、CA15-3在外周血中表达状况相关。与Her-2表达状况、患者年龄、腋窝淋巴结转移状况密切相关。结论:乳腺癌微转移是乳腺癌相对独立的预后因子,Nested-RT- PCR是检测乳腺癌微转移的有效技术。SBEM-mRNA、hMAM-mRNA特异表达于乳腺癌患者的外周血,SBEM-mRNA或hMAM-mRNA阳性提示血循环中有乳腺癌细胞,预示着有血源性转移的可能;在检测微转移中SBEM-mRNA与hMAM-mRNA同样有效。
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