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设计了一套制备高纯度5-乙酰吡哆醇(5-AcPN)的酶催化反应体系,对产物进行了鉴定,通过对三种脂肪酶的筛选发现非水介质中Novozym 435催化吡哆醇酯化能力最强。为了改善吡哆醇溶解度并提高5-AcPN的产率,采用AOT反胶团、乙腈和离子液[bmim]PF6三种反应介质。发现离子液中的位置选择性不同于其它两种,在[bmim]PF6中吡哆醇的4-位羟基活性最高,而在乙腈和反胶团中5-位羟基活性最高。通过筛选,发现乙腈和AOT反胶团是此反应的潜在优良介质,不同的酰基供体不仅对转化率而且对区域选择率会产生重要影响。在乙腈和AOT反胶团中,以乙酸乙烯酯为酰基供体进行Novozym 435催化吡哆醇酯化反应,系统的分析了水含量、温度、底物摩尔比以及酶载量等因素对反应的影响,确定系统的水含量是影响吡哆醇酯化的关键因素。利用响应面法对酶催化5-AcPN合成的反应条件进行了优化,建立了优化模型,并且验证了模型的有效性,确定了三套优化反应条件。结果表明,Novozym 435催化吡哆醇酯化的最大转化率可以达到99%,区域选择率为93%。利用优化条件成功的进行了放大试验,表明该技术具有潜在的工业应用价值。以橄榄油水解为模型反应对Candida rugosa lipase (CRL)在新型CB-Span 85/Span 85/n-hexane反胶团中的活性特征进行了表征。结果表明,酶的加入导致了胶团流体力学半径的变化,Span 85和水分子之间发生了重排。发现足够的CB修饰密度对反胶团溶解水的能力和维持较高酶活具有重要意义,CB-Span 85反胶团中酶活与含水量(W0)之间的关系与AOT反胶团中不同。与水溶液中相比,CRL在反胶团中的最适pH保持不变,但其表观活性显著增加。动力学研究表明,CB-Span 85反胶团中酶催化橄榄油水解遵循米氏方程,表观米氏常数随反胶团浓度的增加而减小,说明酶与底物间的亲和力增加了。反胶团中CRL的稳定性与W0呈负相关性。将CRL固定到磁性纳米载体上得到磁性固定化酶MIE,考察二糖对酶的保护作用。加入二糖后,MIE在干燥和储存过程中的稳定性增加了,其中海藻糖的保护作用最显著,乳糖其次,蔗糖最差,支持‘玻璃态’假说。采用两步失活动力学模型拟合了酶的失活过程,得到了失活速率常数和半衰期,结果加入海藻糖和乳糖之后,MIE的半衰期分别增长了31和23倍。